CAJ | 학술논문

目的:为快速检测食品中的伏马毒素B1 (fumonisin B1,FB1),制备抗FB1的单克隆抗体并利用该抗体研制基于时间分辨免疫荧光分析方法的检测试剂盒.方法:在建立抗伏马毒素B1单克隆杂交瘤细胞株的基础上,采用小鼠腹腔注射法生产大量腹水,经Protein A亲和层析柱分离纯化、透析后得到单克隆抗体,利用所得抗体建立间接竞争性时间分辨免疫荧光分析试剂盒并优化各参数:线性范围、检出限及与黄曲霉毒素(aflatoxins,AFB1)、呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)和载体蛋白BSA等的交叉反应性；对试剂盒稳定性采用37℃破坏实验；采用3个浓度的加标回收试验确定回收率；对19份样品及FB1玉米盲样进行检测,并同时用市售ELISA试剂盒进行验证.结果:所研制试剂盒的最低检出浓度为2 ng/mL,检测线性范围为2～512 ng/mL,线性方程为Y=-0.644X+12.872 (R2=0.998),50％抑制浓度为10.07 ng/mL,加标提取后,玉米样品3个加标水平的回收率在78.32％～116.76％之间,与AFB1、DON和BSA均无交叉反应性,试剂盒常温下可保存315 d以上.结论:本研究建立了快速、敏感检测FB1的时间分辨免疫荧光检测试剂盒.
목적:위쾌속검측식품중적복마독소B1 (fumonisin B1,FB1),제비항FB1적단극륭항체병이용해항체연제기우시간분변면역형광분석방법적검측시제합.방법:재건립항복마독소B1단극륭잡교류세포주적기출상,채용소서복강주사법생산대량복수,경Protein A친화층석주분리순화、투석후득도단극륭항체,이용소득항체건립간접경쟁성시간분변면역형광분석시제합병우화각삼수:선성범위、검출한급여황곡매독소(aflatoxins,AFB1)、구토독소(deoxynivalenol,DON)화재체단백BSA등적교차반응성；대시제합은정성채용37℃파배실험；채용3개농도적가표회수시험학정회수솔；대19빈양품급FB1옥미맹양진행검측,병동시용시수ELISA시제합진행험증.결과:소연제시제합적최저검출농도위2 ng/mL,검측선성범위위2～512 ng/mL,선성방정위Y=-0.644X+12.872 (R2=0.998),50％억제농도위10.07 ng/mL,가표제취후,옥미양품3개가표수평적회수솔재78.32％～116.76％지간,여AFB1、DON화BSA균무교차반응성,시제합상온하가보존315 d이상.결론:본연구건립료쾌속、민감검측FB1적시간분변면역형광검측시제합.