癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2013年
1期
1-6
,共6页
熊果酸%小鼠%肿瘤
熊果痠%小鼠%腫瘤
웅과산%소서%종류
目的:观察熊果酸(ursolic acid,UA)对小鼠H22移植瘤的抑制作用并对其机制进行探讨.方法:将75只昆明种小鼠于左前腋下皮下接种H22肝癌细胞,24 h后随机分为5组,每组15只,模型组、环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)对照组[25 mg/(kg·d)]和UA低、中、高剂量药物组[50、100、150 mg/(kg·d)].UA各剂量组和CP对照组分别以相应剂量UA和CP灌胃,模型组以等体积花生油灌胃,每天灌胃1次,连续给药2周.末次给药24 h后,称小鼠体质量,摘除眼球取血后处死.无菌条件下完整剥离小鼠肿瘤及肝、肾、脾组织,计算抑瘤率及肝、肾、脾指数；HE染色观察肿瘤组织病理学改变；分离脾淋巴细胞,CCK8法测定小鼠脾淋巴细胞增殖活性；免疫组化法检测肿瘤组织中CD4+、CD8+T细胞亚群的分布情况,计数CD4+T细胞和CD8+T细胞个数.并采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中白细胞介素12 (interleukin-12,IL-12)的浓度.结果:UA各剂量组小鼠H22肿瘤质量增长均较缓慢,其中UA中、高剂量组肿瘤质量明显减小,与模型组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05)；UA中、高剂量组抑瘤率分别为30.15％和39.80％.UA各剂量组肝、肾指数与模型组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而脾指数则随UA剂量增加逐渐升高,其中,UA中、高剂量组脾指数与模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).HE染色病理观察结果显示,模型组肿瘤细胞生长旺盛,细胞体积较大,胞质丰富,少见坏死区域；UA干预组肿瘤组织中瘤细胞生长增殖明显受到抑制,肿瘤细胞数量减少,密度降低,排列稀疏,细胞核固缩深染或破裂,细胞间质较多,核浆比例减少,坏死区域明显增多.CCK8实验结果显示,随着UA剂量增加,脾淋巴细胞增殖活性逐渐升高,其中,UA中、高剂量组脾淋巴细胞增殖活性显著升高,与模型组间的差异具有统计学意义(P＜0.05).免疫组化结果显示,UA中、高剂量组肿瘤组织中CD4+、CD8+T细胞个数与模型组比较均明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).UA高、中、低剂量组血清中IL-12的含量均较模型组升高,差异均有统计学意义(P＜0.05)；UA高剂量组与CP对照组相比亦显著升高(P＜0.05).结论:一定剂量UA可抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长,其作用机制可能与UA促进机体免疫器官发育和淋巴细胞增殖,增加CD4+、CD8+T细胞向肿瘤组织浸润,并提高血清中IL-12等抗肿瘤活性细胞因子的浓度诱导细胞免疫有关.
目的:觀察熊果痠(ursolic acid,UA)對小鼠H22移植瘤的抑製作用併對其機製進行探討.方法:將75隻昆明種小鼠于左前腋下皮下接種H22肝癌細胞,24 h後隨機分為5組,每組15隻,模型組、環燐酰胺(cyclophosphamide,CP)對照組[25 mg/(kg·d)]和UA低、中、高劑量藥物組[50、100、150 mg/(kg·d)].UA各劑量組和CP對照組分彆以相應劑量UA和CP灌胃,模型組以等體積花生油灌胃,每天灌胃1次,連續給藥2週.末次給藥24 h後,稱小鼠體質量,摘除眼毬取血後處死.無菌條件下完整剝離小鼠腫瘤及肝、腎、脾組織,計算抑瘤率及肝、腎、脾指數；HE染色觀察腫瘤組織病理學改變；分離脾淋巴細胞,CCK8法測定小鼠脾淋巴細胞增殖活性；免疫組化法檢測腫瘤組織中CD4+、CD8+T細胞亞群的分佈情況,計數CD4+T細胞和CD8+T細胞箇數.併採用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清中白細胞介素12 (interleukin-12,IL-12)的濃度.結果:UA各劑量組小鼠H22腫瘤質量增長均較緩慢,其中UA中、高劑量組腫瘤質量明顯減小,與模型組比較,差異均具有統計學意義(P＜0.05)；UA中、高劑量組抑瘤率分彆為30.15％和39.80％.UA各劑量組肝、腎指數與模型組比較差異無統計學意義(P＞0.05),而脾指數則隨UA劑量增加逐漸升高,其中,UA中、高劑量組脾指數與模型組比較差異具有統計學意義(P＜0.05).HE染色病理觀察結果顯示,模型組腫瘤細胞生長旺盛,細胞體積較大,胞質豐富,少見壞死區域；UA榦預組腫瘤組織中瘤細胞生長增殖明顯受到抑製,腫瘤細胞數量減少,密度降低,排列稀疏,細胞覈固縮深染或破裂,細胞間質較多,覈漿比例減少,壞死區域明顯增多.CCK8實驗結果顯示,隨著UA劑量增加,脾淋巴細胞增殖活性逐漸升高,其中,UA中、高劑量組脾淋巴細胞增殖活性顯著升高,與模型組間的差異具有統計學意義(P＜0.05).免疫組化結果顯示,UA中、高劑量組腫瘤組織中CD4+、CD8+T細胞箇數與模型組比較均明顯增加,差異具有統計學意義(P＜0.05).UA高、中、低劑量組血清中IL-12的含量均較模型組升高,差異均有統計學意義(P＜0.05)；UA高劑量組與CP對照組相比亦顯著升高(P＜0.05).結論:一定劑量UA可抑製H22荷瘤小鼠腫瘤生長,其作用機製可能與UA促進機體免疫器官髮育和淋巴細胞增殖,增加CD4+、CD8+T細胞嚮腫瘤組織浸潤,併提高血清中IL-12等抗腫瘤活性細胞因子的濃度誘導細胞免疫有關.
목적:관찰웅과산(ursolic acid,UA)대소서H22이식류적억제작용병대기궤제진행탐토.방법:장75지곤명충소서우좌전액하피하접충H22간암세포,24 h후수궤분위5조,매조15지,모형조、배린선알(cyclophosphamide,CP)대조조[25 mg/(kg·d)]화UA저、중、고제량약물조[50、100、150 mg/(kg·d)].UA각제량조화CP대조조분별이상응제량UA화CP관위,모형조이등체적화생유관위,매천관위1차,련속급약2주.말차급약24 h후,칭소서체질량,적제안구취혈후처사.무균조건하완정박리소서종류급간、신、비조직,계산억류솔급간、신、비지수；HE염색관찰종류조직병이학개변；분리비림파세포,CCK8법측정소서비림파세포증식활성；면역조화법검측종류조직중CD4+、CD8+T세포아군적분포정황,계수CD4+T세포화CD8+T세포개수.병채용매련면역흡부법(ELISA)검측혈청중백세포개소12 (interleukin-12,IL-12)적농도.결과:UA각제량조소서H22종류질량증장균교완만,기중UA중、고제량조종류질량명현감소,여모형조비교,차이균구유통계학의의(P＜0.05)；UA중、고제량조억류솔분별위30.15％화39.80％.UA각제량조간、신지수여모형조비교차이무통계학의의(P＞0.05),이비지수칙수UA제량증가축점승고,기중,UA중、고제량조비지수여모형조비교차이구유통계학의의(P＜0.05).HE염색병리관찰결과현시,모형조종류세포생장왕성,세포체적교대,포질봉부,소견배사구역；UA간예조종류조직중류세포생장증식명현수도억제,종류세포수량감소,밀도강저,배렬희소,세포핵고축심염혹파렬,세포간질교다,핵장비례감소,배사구역명현증다.CCK8실험결과현시,수착UA제량증가,비림파세포증식활성축점승고,기중,UA중、고제량조비림파세포증식활성현저승고,여모형조간적차이구유통계학의의(P＜0.05).면역조화결과현시,UA중、고제량조종류조직중CD4+、CD8+T세포개수여모형조비교균명현증가,차이구유통계학의의(P＜0.05).UA고、중、저제량조혈청중IL-12적함량균교모형조승고,차이균유통계학의의(P＜0.05)；UA고제량조여CP대조조상비역현저승고(P＜0.05).결론:일정제량UA가억제H22하류소서종류생장,기작용궤제가능여UA촉진궤체면역기관발육화림파세포증식,증가CD4+、CD8+T세포향종류조직침윤,병제고혈청중IL-12등항종류활성세포인자적농도유도세포면역유관.
