CAJ | 학술논문

目的在 GIRK4通道蛋白中加入 FLAG 标记短肽,并检测通道功能是否受到影响。方法运用聚合酶链式反应(PCR)技术合成带有 FLAG 标记的 GIRK4通道片段,并将该片段插入至载体 pGEMHE 质粒 DNA 中。使用免疫印迹检测 FLAG 短肽是否与 GIRK4通道蛋白融合,并使用双电极电压钳(two-microelectrode voltage clamp,TEVC)检测通道的表达情况。结果经测序鉴定,确认成功构建了重组质粒 DNA 即 FLAG-GIRK4-pGEMHE,使用双电极电压钳检测有通道电流。结论通过 PCR 技术成功构建重组质粒 DNA,即 FLAG-GIRK4-pGEMHE,且 FLAG 标记蛋白已稳定表达并且未影响 GIRK4通道蛋白的功能,为今后研究 GIRK4通道蛋白功能提供了简便途径。
목적재 GIRK4통도단백중가입 FLAG 표기단태,병검측통도공능시부수도영향。방법운용취합매련식반응(PCR)기술합성대유 FLAG 표기적 GIRK4통도편단,병장해편단삽입지재체 pGEMHE 질립 DNA 중。사용면역인적검측 FLAG 단태시부여 GIRK4통도단백융합,병사용쌍전겁전압겸(two-microelectrode voltage clamp,TEVC)검측통도적표체정황。결과경측서감정,학인성공구건료중조질립 DNA 즉 FLAG-GIRK4-pGEMHE,사용쌍전겁전압겸검측유통도전류。결론통과 PCR 기술성공구건중조질립 DNA,즉 FLAG-GIRK4-pGEMHE,차 FLAG 표기단백이은정표체병차미영향 GIRK4통도단백적공능,위금후연구 GIRK4통도단백공능제공료간편도경。