卒中与神经疾病
卒中與神經疾病
졸중여신경질병
2014年
2期
67-71
,共5页
闫鹏%乔娴%孙圣刚%刘金玲%郑瑾
閆鵬%喬嫻%孫聖剛%劉金玲%鄭瑾
염붕%교한%손골강%류금령%정근
ADDLs(Aβ寡聚体)%混合培养体系%Notch-1%HIF-1α
ADDLs(Aβ寡聚體)%混閤培養體繫%Notch-1%HIF-1α
ADDLs(Aβ과취체)%혼합배양체계%Notch-1%HIF-1α
ADDLs(Aβ-derived diffusible ligands)%Co-culture system%Notch-1%HIF-1α
目的 探讨Aβ寡聚体(ADDLs)对原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系Notch-1信号转导及HIF-1α蛋白表达的影响.方法 在原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系的基础之上应用CCK-8法观察Aβ寡聚体对混合培养体系细胞活力的影响,并应用免疫印迹的方法检测Aβ寡聚体对混合培养体系的NICD及HIF-1α水平的影响.另外,应用qPCR的方法检测凋亡相关caspase-3mRNA水平.结果 Aβ寡聚体干预浓度在高于2 μM的情况下可使混合培养体系细胞活力水平明显降低,并呈现浓度依赖.10μM的ADDLs明显升高了原代混合培养体系的NICD及HIF-1α蛋白表达水平,且均呈现出相对的时间依赖性,同时这两种蛋白表达水平的变化表现出基本一致的趋势.同时,10μM的ADDLs明显上调了混合体系的caspase-3 mRNA水平.结论 Aβ寡聚对原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系的毒性作用与上调NICD及HIF-1α表达水平密切相关.
目的 探討Aβ寡聚體(ADDLs)對原代培養小鼠皮層神經元及星形膠質細胞混閤培養體繫Notch-1信號轉導及HIF-1α蛋白錶達的影響.方法 在原代培養小鼠皮層神經元及星形膠質細胞混閤培養體繫的基礎之上應用CCK-8法觀察Aβ寡聚體對混閤培養體繫細胞活力的影響,併應用免疫印跡的方法檢測Aβ寡聚體對混閤培養體繫的NICD及HIF-1α水平的影響.另外,應用qPCR的方法檢測凋亡相關caspase-3mRNA水平.結果 Aβ寡聚體榦預濃度在高于2 μM的情況下可使混閤培養體繫細胞活力水平明顯降低,併呈現濃度依賴.10μM的ADDLs明顯升高瞭原代混閤培養體繫的NICD及HIF-1α蛋白錶達水平,且均呈現齣相對的時間依賴性,同時這兩種蛋白錶達水平的變化錶現齣基本一緻的趨勢.同時,10μM的ADDLs明顯上調瞭混閤體繫的caspase-3 mRNA水平.結論 Aβ寡聚對原代培養小鼠皮層神經元及星形膠質細胞混閤培養體繫的毒性作用與上調NICD及HIF-1α錶達水平密切相關.
목적 탐토Aβ과취체(ADDLs)대원대배양소서피층신경원급성형효질세포혼합배양체계Notch-1신호전도급HIF-1α단백표체적영향.방법 재원대배양소서피층신경원급성형효질세포혼합배양체계적기출지상응용CCK-8법관찰Aβ과취체대혼합배양체계세포활력적영향,병응용면역인적적방법검측Aβ과취체대혼합배양체계적NICD급HIF-1α수평적영향.령외,응용qPCR적방법검측조망상관caspase-3mRNA수평.결과 Aβ과취체간예농도재고우2 μM적정황하가사혼합배양체계세포활력수평명현강저,병정현농도의뢰.10μM적ADDLs명현승고료원대혼합배양체계적NICD급HIF-1α단백표체수평,차균정현출상대적시간의뢰성,동시저량충단백표체수평적변화표현출기본일치적추세.동시,10μM적ADDLs명현상조료혼합체계적caspase-3 mRNA수평.결론 Aβ과취대원대배양소서피층신경원급성형효질세포혼합배양체계적독성작용여상조NICD급HIF-1α표체수평밀절상관.
