CAJ | 학술논문

为获得可以区分自然感染和疫苗免疫且毒力较弱的布鲁氏菌候选疫苗株,本实验研究了磷酸葡萄糖变位酶基因(pgm)对布鲁氏菌(Brucella melitensis)M5-90疫苗株毒力的影响,并对其进行了免疫评价.本实验构建了重组质粒pGEM-7zf-△pgm,电转化布鲁氏菌M5-90感受态细胞,筛选获得布鲁氏菌疫苗株M5-90的pgm基因缺失株(△pgm),并对获得的M5-90 △pgm株进行遗传稳定性、免疫原性检测.结果显示,△pgm能稳定传15代；△pgm组的抗体含量较亲本株M5-90组差异不显著；△pgm在诱导机体产生IL-2的能力要强于M5-90,产生INF-γ的能力低于M5-90;该基因缺失株采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验不发生凝集反应;Western blot证实,△pgm不能诱导小鼠产生抗pgm蛋白的抗体.本研究构建的△pgm具有很好的遗传稳定性和免疫原性,为研制布鲁氏菌基因缺失疫苗提供了实验依据.
위획득가이구분자연감염화역묘면역차독력교약적포로씨균후선역묘주,본실험연구료린산포도당변위매기인(pgm)대포로씨균(Brucella melitensis)M5-90역묘주독력적영향,병대기진행료면역평개.본실험구건료중조질립pGEM-7zf-△pgm,전전화포로씨균M5-90감수태세포,사선획득포로씨균역묘주M5-90적pgm기인결실주(△pgm),병대획득적M5-90 △pgm주진행유전은정성、면역원성검측.결과현시,△pgm능은정전15대；△pgm조적항체함량교친본주M5-90조차이불현저；△pgm재유도궤체산생IL-2적능력요강우M5-90,산생INF-γ적능력저우M5-90;해기인결실주채용호홍평판응집시험화시관응집시험불발생응집반응;Western blot증실,△pgm불능유도소서산생항pgm단백적항체.본연구구건적△pgm구유흔호적유전은정성화면역원성,위연제포로씨균기인결실역묘제공료실험의거.