CAJ | 학술논문

为阐明miR-128a在大鼠前体脂肪细胞分化过程中的功能,本实验检测了大鼠(Rattus norvegicus)前体脂肪细胞成脂分化过程中miR-128a的表达,明确其在分化过程中的表达趋势；构建miR-128a的腺病毒过表达载体并侵染大鼠前体脂肪细胞,随后采用Real-time PCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平检测了成脂标记基因过氧化物酶体增生物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)和脂肪酸结合蛋白2(adipocyte protein 2,aP2)的表达；过表达miR-128a的大鼠前体脂肪细胞在第10天进行油红O染色,从形态学上观察成脂分化情况.结果显示,miR-128a的表达量在脂肪细胞诱导分化第二天降到最低点,随后维持在第0天的水平.在过表达miR-128a后,大鼠前体脂肪细胞成脂标记基因PPARγ和aP2的蛋白表达量与对照相比显著下降,脂滴明显少于对照组.实验结果表明:在大鼠前体脂肪细胞中过表达miR-128a能够抑制前体脂肪细胞的分化；并且通过PPARγ mRNA和蛋白水平的差异性变化,结合miRNA的作用机理,推测PPARγ有可能是miR-128a的靶基因.本实验也为研究miR-128a在脂肪细胞分化中发挥作用的机理提供了理论基础.
위천명miR-128a재대서전체지방세포분화과정중적공능,본실험검측료대서(Rattus norvegicus)전체지방세포성지분화과정중miR-128a적표체,명학기재분화과정중적표체추세；구건miR-128a적선병독과표체재체병침염대서전체지방세포,수후채용Real-time PCR화Western blot분별재mRNA화단백수평검측료성지표기기인과양화물매체증생물격활수체γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)화지방산결합단백2(adipocyte protein 2,aP2)적표체；과표체miR-128a적대서전체지방세포재제10천진행유홍O염색,종형태학상관찰성지분화정황.결과현시,miR-128a적표체량재지방세포유도분화제이천강도최저점,수후유지재제0천적수평.재과표체miR-128a후,대서전체지방세포성지표기기인PPARγ화aP2적단백표체량여대조상비현저하강,지적명현소우대조조.실험결과표명:재대서전체지방세포중과표체miR-128a능구억제전체지방세포적분화；병차통과PPARγ mRNA화단백수평적차이성변화,결합miRNA적작용궤리,추측PPARγ유가능시miR-128a적파기인.본실험야위연구miR-128a재지방세포분화중발휘작용적궤리제공료이론기출.