农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2013年
4期
379-387
,共9页
宋子仪%史新娥%杨浩%高倩%赵丽丽%杨公社
宋子儀%史新娥%楊浩%高倩%趙麗麗%楊公社
송자의%사신아%양호%고천%조려려%양공사
猪成熟脂肪细胞%新式天花板培养法%去分化%脂解
豬成熟脂肪細胞%新式天花闆培養法%去分化%脂解
저성숙지방세포%신식천화판배양법%거분화%지해
成熟脂肪细胞在天花板培养(ceiling culture)条件下可自发去分化为不含脂滴的成纤维细胞(dedifferentiated fat cell,DFAT),这种细胞体外可向多个谱系分化,因此近年来备受人们关注.为研究猪成熟脂肪细胞去分化过程中关键基因表达规律,本研究先分离、鉴定了猪成熟脂肪细胞,然后采用一种新的天花板培养法使其发生去分化,再用实时定量PCR(RT-qPCR)技术分析了猪成熟脂肪细胞去分化过程中关键基因的表达变化,最后用1μmol/L罗格列酮(Rosiglitazone)处理猪成熟脂肪细胞,研究增强成脂对去分化的影响.结果显示:分离的猪成熟脂肪细胞的纯度高达98.7%,并且新式天花板培养法能够高效的使其发生去分化;在去分化的过程中中后期成脂关键基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(aP2)和脂蛋白酯酶(LPL)的mRNA水平分别上调了8、3和7.5倍,而脂肪分解关键基因激素敏感脂酶(HSL)和脂肪组织甘油三酯脂肪酶(ATGL)的mRNA水平分别上调了40倍和10倍;罗格列酮处理能够显著抑制猪成熟脂肪细胞去分化(P<0.05).这些结果说明,成熟脂肪细胞去分化是一个以脂解为主并伴有一定水平成脂的脂代谢过程,这为进一步研究成熟脂肪细胞去分化机理提供了理论依据.
成熟脂肪細胞在天花闆培養(ceiling culture)條件下可自髮去分化為不含脂滴的成纖維細胞(dedifferentiated fat cell,DFAT),這種細胞體外可嚮多箇譜繫分化,因此近年來備受人們關註.為研究豬成熟脂肪細胞去分化過程中關鍵基因錶達規律,本研究先分離、鑒定瞭豬成熟脂肪細胞,然後採用一種新的天花闆培養法使其髮生去分化,再用實時定量PCR(RT-qPCR)技術分析瞭豬成熟脂肪細胞去分化過程中關鍵基因的錶達變化,最後用1μmol/L囉格列酮(Rosiglitazone)處理豬成熟脂肪細胞,研究增彊成脂對去分化的影響.結果顯示:分離的豬成熟脂肪細胞的純度高達98.7%,併且新式天花闆培養法能夠高效的使其髮生去分化;在去分化的過程中中後期成脂關鍵基因過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)、脂肪細胞型脂肪痠結閤蛋白(aP2)和脂蛋白酯酶(LPL)的mRNA水平分彆上調瞭8、3和7.5倍,而脂肪分解關鍵基因激素敏感脂酶(HSL)和脂肪組織甘油三酯脂肪酶(ATGL)的mRNA水平分彆上調瞭40倍和10倍;囉格列酮處理能夠顯著抑製豬成熟脂肪細胞去分化(P<0.05).這些結果說明,成熟脂肪細胞去分化是一箇以脂解為主併伴有一定水平成脂的脂代謝過程,這為進一步研究成熟脂肪細胞去分化機理提供瞭理論依據.
성숙지방세포재천화판배양(ceiling culture)조건하가자발거분화위불함지적적성섬유세포(dedifferentiated fat cell,DFAT),저충세포체외가향다개보계분화,인차근년래비수인문관주.위연구저성숙지방세포거분화과정중관건기인표체규률,본연구선분리、감정료저성숙지방세포,연후채용일충신적천화판배양법사기발생거분화,재용실시정량PCR(RT-qPCR)기술분석료저성숙지방세포거분화과정중관건기인적표체변화,최후용1μmol/L라격렬동(Rosiglitazone)처리저성숙지방세포,연구증강성지대거분화적영향.결과현시:분리적저성숙지방세포적순도고체98.7%,병차신식천화판배양법능구고효적사기발생거분화;재거분화적과정중중후기성지관건기인과양화물매체증식물격활수체γ(PPARγ)、지방세포형지방산결합단백(aP2)화지단백지매(LPL)적mRNA수평분별상조료8、3화7.5배,이지방분해관건기인격소민감지매(HSL)화지방조직감유삼지지방매(ATGL)적mRNA수평분별상조료40배화10배;라격렬동처리능구현저억제저성숙지방세포거분화(P<0.05).저사결과설명,성숙지방세포거분화시일개이지해위주병반유일정수평성지적지대사과정,저위진일보연구성숙지방세포거분화궤리제공료이론의거.