东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
4期
126-131
,共6页
樊东%郭博智%高艳玲%赵奎军%王晓云
樊東%郭博智%高豔玲%趙奎軍%王曉雲
번동%곽박지%고염령%조규군%왕효운
小地老虎%几丁质脱乙酰基酶%克隆%序列分析%原核表达
小地老虎%幾丁質脫乙酰基酶%剋隆%序列分析%原覈錶達
소지로호%궤정질탈을선기매%극륭%서렬분석%원핵표체
几丁质脱乙酰基酶(Chitin deacetylase,CDA)可以将几丁质修饰为壳聚糖,在昆虫几丁质代谢中具有重要作用。研究以小地老虎(Agrotis ipsilon Hufngel)5龄幼虫虫体为材料提取总RNA,利用RT-PCR和RACE技术,扩增得到小地老虎几丁质脱乙酰基酶基因的cDNA序列。该序列含有2048个碱基,包括一个1626个碱基的开放读码框,编码541个氨基酸,分子质量约为61.7 ku,多肽的等电点为5.03。推导得到的氨基酸序列与其他昆虫,尤其是鳞翅目昆虫的几丁质脱乙酰基酶高度同源。所获小地老虎CDA基因的cDNA序列已登录GenBank并获得登录号,登录号为JQ012932。将CDA基因连接到PET21b载体上转入到BL21中诱导表达,SDS-PAGE电泳得到目的蛋白条带。
幾丁質脫乙酰基酶(Chitin deacetylase,CDA)可以將幾丁質脩飾為殼聚糖,在昆蟲幾丁質代謝中具有重要作用。研究以小地老虎(Agrotis ipsilon Hufngel)5齡幼蟲蟲體為材料提取總RNA,利用RT-PCR和RACE技術,擴增得到小地老虎幾丁質脫乙酰基酶基因的cDNA序列。該序列含有2048箇堿基,包括一箇1626箇堿基的開放讀碼框,編碼541箇氨基痠,分子質量約為61.7 ku,多肽的等電點為5.03。推導得到的氨基痠序列與其他昆蟲,尤其是鱗翅目昆蟲的幾丁質脫乙酰基酶高度同源。所穫小地老虎CDA基因的cDNA序列已登錄GenBank併穫得登錄號,登錄號為JQ012932。將CDA基因連接到PET21b載體上轉入到BL21中誘導錶達,SDS-PAGE電泳得到目的蛋白條帶。
궤정질탈을선기매(Chitin deacetylase,CDA)가이장궤정질수식위각취당,재곤충궤정질대사중구유중요작용。연구이소지로호(Agrotis ipsilon Hufngel)5령유충충체위재료제취총RNA,이용RT-PCR화RACE기술,확증득도소지로호궤정질탈을선기매기인적cDNA서렬。해서렬함유2048개감기,포괄일개1626개감기적개방독마광,편마541개안기산,분자질량약위61.7 ku,다태적등전점위5.03。추도득도적안기산서렬여기타곤충,우기시린시목곤충적궤정질탈을선기매고도동원。소획소지로호CDA기인적cDNA서렬이등록GenBank병획득등록호,등록호위JQ012932。장CDA기인련접도PET21b재체상전입도BL21중유도표체,SDS-PAGE전영득도목적단백조대。