辽宁大学学报（自然科学版）
遼寧大學學報（自然科學版）
료녕대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2012年
1期
12-14
,共3页
吕永通%李文燕%杨帆%赵小慧%胡风庆%回晶
呂永通%李文燕%楊帆%趙小慧%鬍風慶%迴晶
려영통%리문연%양범%조소혜%호풍경%회정
肠激酶%表达%纯化
腸激酶%錶達%純化
장격매%표체%순화
肠激酶作为一种丝氨酸蛋白酶,能够识别顺序-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,水解赖氨酸C端的肽键.根据NCBI中牛肠激酶基因序列(L19663)设计18条引物,通过重叠延伸拼接PCR技术(SOE-PCR)扩增两端带有酶切位点的牛肠激酶轻链基因.构建表达载体pET32a-EK,表达载体转化E.coli BL21 (DE3),利用IPTG诱导表达嵌合蛋白,并用离子交换柱层析纯化肠激酶,获得了高纯度的重组肠激酶轻链蛋白,为大规模生产打下了基础.
腸激酶作為一種絲氨痠蛋白酶,能夠識彆順序-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,水解賴氨痠C耑的肽鍵.根據NCBI中牛腸激酶基因序列(L19663)設計18條引物,通過重疊延伸拼接PCR技術(SOE-PCR)擴增兩耑帶有酶切位點的牛腸激酶輕鏈基因.構建錶達載體pET32a-EK,錶達載體轉化E.coli BL21 (DE3),利用IPTG誘導錶達嵌閤蛋白,併用離子交換柱層析純化腸激酶,穫得瞭高純度的重組腸激酶輕鏈蛋白,為大規模生產打下瞭基礎.
장격매작위일충사안산단백매,능구식별순서-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,수해뢰안산C단적태건.근거NCBI중우장격매기인서렬(L19663)설계18조인물,통과중첩연신병접PCR기술(SOE-PCR)확증량단대유매절위점적우장격매경련기인.구건표체재체pET32a-EK,표체재체전화E.coli BL21 (DE3),이용IPTG유도표체감합단백,병용리자교환주층석순화장격매,획득료고순도적중조장격매경련단백,위대규모생산타하료기출.
