实验动物与比较医学
實驗動物與比較醫學
실험동물여비교의학
LABORATORY ANIMAL AND COMPARATIVE MEDICINE
2012年
5期
371-375
,共5页
李瑶%吴刘成%卢泽艳%郑良凤%葛良玉%邵义祥
李瑤%吳劉成%盧澤豔%鄭良鳳%葛良玉%邵義祥
리요%오류성%로택염%정량봉%갈량옥%소의상
B6-Co小鼠%角膜混浊%PCR体外扩增%基因克隆
B6-Co小鼠%角膜混濁%PCR體外擴增%基因剋隆
B6-Co소서%각막혼탁%PCR체외확증%기인극륭
目的 对B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4基因进行克隆测序分析,寻找是否存在突变位点.方法 以小鼠Ankrd55和Ddx4基因的mRNA序列设计引物,以mRNA为模板,采用RT-PCR和PCR技术分段进行目的基因扩增,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,提取质粒DNA分子,电泳检测,EooR(E)酶切释放目的片段,测序、分析、比对.结果 Ddx4基因位于小鼠13号染色体第113412349的碱基由C转换成A,导致编码氨基酸的密码子改变,产物脯氨酸(P)变成谷氨酰胺(Q).结论 Ddx4基因发生单碱基突变,表明该突变可能与B6-Co小鼠的EOB表型相关,但是有待于进一步研究.
目的 對B6-Co小鼠Ankrd55和Ddx4基因進行剋隆測序分析,尋找是否存在突變位點.方法 以小鼠Ankrd55和Ddx4基因的mRNA序列設計引物,以mRNA為模闆,採用RT-PCR和PCR技術分段進行目的基因擴增,將目的片段連接在T載體上,轉化至感受態細胞,篩選暘性剋隆,提取質粒DNA分子,電泳檢測,EooR(E)酶切釋放目的片段,測序、分析、比對.結果 Ddx4基因位于小鼠13號染色體第113412349的堿基由C轉換成A,導緻編碼氨基痠的密碼子改變,產物脯氨痠(P)變成穀氨酰胺(Q).結論 Ddx4基因髮生單堿基突變,錶明該突變可能與B6-Co小鼠的EOB錶型相關,但是有待于進一步研究.
목적 대B6-Co소서Ankrd55화Ddx4기인진행극륭측서분석,심조시부존재돌변위점.방법 이소서Ankrd55화Ddx4기인적mRNA서렬설계인물,이mRNA위모판,채용RT-PCR화PCR기술분단진행목적기인확증,장목적편단련접재T재체상,전화지감수태세포,사선양성극륭,제취질립DNA분자,전영검측,EooR(E)매절석방목적편단,측서、분석、비대.결과 Ddx4기인위우소서13호염색체제113412349적감기유C전환성A,도치편마안기산적밀마자개변,산물포안산(P)변성곡안선알(Q).결론 Ddx4기인발생단감기돌변,표명해돌변가능여B6-Co소서적EOB표형상관,단시유대우진일보연구.
