广西植物
廣西植物
엄서식물
GUIHAIA
2012年
5期
710-714,609
,共6页
烟草%磷酸吡哆醛%水解酶%纯化%酶性质
煙草%燐痠吡哆醛%水解酶%純化%酶性質
연초%린산필치철%수해매%순화%매성질
采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换、Sephadex G-100凝胶过滤和SP Sephadex C-25阳离子交换柱层析等步骤,对烟草磷酸吡哆醛水解酶进行了分离纯化.结果表明:该酶被纯化了119.6倍,得率为28.49％,经凝胶过滤和SDS-PAGE测得该酶的全分子量为49.6 kDa,亚基分子量约为25 kDa;该酶最适温度为50℃,最适反应pH为5.5;Mg2+、Ca2+、Mn2+等对该酶有激活作用,金属离子螯合剂EDTA对酶有抑制作用,加入Mg2+后抑制作用得到解除；在最适反应条件下,测得反应底物磷酸吡哆醛(PLP)和磷酸吡哆胺(PMP)的Km值分别为0.23 mmol/L和0.56 mmol/L.
採用硫痠銨沉澱、DEAE-Sepharose Fast Flow陰離子交換、Sephadex G-100凝膠過濾和SP Sephadex C-25暘離子交換柱層析等步驟,對煙草燐痠吡哆醛水解酶進行瞭分離純化.結果錶明:該酶被純化瞭119.6倍,得率為28.49％,經凝膠過濾和SDS-PAGE測得該酶的全分子量為49.6 kDa,亞基分子量約為25 kDa;該酶最適溫度為50℃,最適反應pH為5.5;Mg2+、Ca2+、Mn2+等對該酶有激活作用,金屬離子螯閤劑EDTA對酶有抑製作用,加入Mg2+後抑製作用得到解除；在最適反應條件下,測得反應底物燐痠吡哆醛(PLP)和燐痠吡哆胺(PMP)的Km值分彆為0.23 mmol/L和0.56 mmol/L.
채용류산안침정、DEAE-Sepharose Fast Flow음리자교환、Sephadex G-100응효과려화SP Sephadex C-25양리자교환주층석등보취,대연초린산필치철수해매진행료분리순화.결과표명:해매피순화료119.6배,득솔위28.49％,경응효과려화SDS-PAGE측득해매적전분자량위49.6 kDa,아기분자량약위25 kDa;해매최괄온도위50℃,최괄반응pH위5.5;Mg2+、Ca2+、Mn2+등대해매유격활작용,금속리자오합제EDTA대매유억제작용,가입Mg2+후억제작용득도해제；재최괄반응조건하,측득반응저물린산필치철(PLP)화린산필치알(PMP)적Km치분별위0.23 mmol/L화0.56 mmol/L.
