组织工程与重建外科杂志
組織工程與重建外科雜誌
조직공정여중건외과잡지
JOURNAL OF TISSUE ENGINEERING AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2012年
6期
305-310
,共6页
程中良%邹翔宇%吴帅%琚官群%朱英坚
程中良%鄒翔宇%吳帥%琚官群%硃英堅
정중량%추상우%오수%거관군%주영견
微囊泡%腹膜间皮细胞%组织工程%血管化
微囊泡%腹膜間皮細胞%組織工程%血管化
미낭포%복막간피세포%조직공정%혈관화
目的 探讨人脐静脉内皮细胞(hUVECs)来源的微囊泡(MVs)促进大鼠腹膜间皮细胞(rPMC)增殖及促进组织工程化腹膜样组织血管化的作用.方法 采用胶原酶消化法获得hUVECs,无血清培养法刺激释放MVs,并对MVs行电镜检测.rPMC与hUVECs来源的MVs体外共培养,对细胞及上清液分别行CCK、ELISA和RT-PCR检测.将rPMC种植在小肠黏膜下层(SIS)表面,分别与加入MVs的培养基和单独培养基预培养1周后,植入裸鼠皮下;2周后取出移植物行HE染色,镜下观察.结果 透射电镜下可以看到有完整的膜结构的hUVECs分泌的MVs.加入MVs组与对照组相比,能明显促进rPMC增殖(P<0.05),同时在上清液中加入MVs组VEGF浓度明显高于对照组(P<0.05).分别对两组rPMC行VEGF的RT-PCR检测,加入MVs组比对照组表达明显增高.对取出的移植物行HE染色,加入MVs组和对照组相比,可见新生的微血管密度明显增高(P<0.05).结论 hUVECs来源的MVs能够明显促进rPMC的增殖,诱导rPMC产生VEGF高表达,刺激组织工程化腹膜样组织血管化,为以腹膜间皮细胞作为尿道组织工程种子细胞和大范围尿道缺损修复提供了理论基础.
目的 探討人臍靜脈內皮細胞(hUVECs)來源的微囊泡(MVs)促進大鼠腹膜間皮細胞(rPMC)增殖及促進組織工程化腹膜樣組織血管化的作用.方法 採用膠原酶消化法穫得hUVECs,無血清培養法刺激釋放MVs,併對MVs行電鏡檢測.rPMC與hUVECs來源的MVs體外共培養,對細胞及上清液分彆行CCK、ELISA和RT-PCR檢測.將rPMC種植在小腸黏膜下層(SIS)錶麵,分彆與加入MVs的培養基和單獨培養基預培養1週後,植入裸鼠皮下;2週後取齣移植物行HE染色,鏡下觀察.結果 透射電鏡下可以看到有完整的膜結構的hUVECs分泌的MVs.加入MVs組與對照組相比,能明顯促進rPMC增殖(P<0.05),同時在上清液中加入MVs組VEGF濃度明顯高于對照組(P<0.05).分彆對兩組rPMC行VEGF的RT-PCR檢測,加入MVs組比對照組錶達明顯增高.對取齣的移植物行HE染色,加入MVs組和對照組相比,可見新生的微血管密度明顯增高(P<0.05).結論 hUVECs來源的MVs能夠明顯促進rPMC的增殖,誘導rPMC產生VEGF高錶達,刺激組織工程化腹膜樣組織血管化,為以腹膜間皮細胞作為尿道組織工程種子細胞和大範圍尿道缺損脩複提供瞭理論基礎.
목적 탐토인제정맥내피세포(hUVECs)래원적미낭포(MVs)촉진대서복막간피세포(rPMC)증식급촉진조직공정화복막양조직혈관화적작용.방법 채용효원매소화법획득hUVECs,무혈청배양법자격석방MVs,병대MVs행전경검측.rPMC여hUVECs래원적MVs체외공배양,대세포급상청액분별행CCK、ELISA화RT-PCR검측.장rPMC충식재소장점막하층(SIS)표면,분별여가입MVs적배양기화단독배양기예배양1주후,식입라서피하;2주후취출이식물행HE염색,경하관찰.결과 투사전경하가이간도유완정적막결구적hUVECs분비적MVs.가입MVs조여대조조상비,능명현촉진rPMC증식(P<0.05),동시재상청액중가입MVs조VEGF농도명현고우대조조(P<0.05).분별대량조rPMC행VEGF적RT-PCR검측,가입MVs조비대조조표체명현증고.대취출적이식물행HE염색,가입MVs조화대조조상비,가견신생적미혈관밀도명현증고(P<0.05).결론 hUVECs래원적MVs능구명현촉진rPMC적증식,유도rPMC산생VEGF고표체,자격조직공정화복막양조직혈관화,위이복막간피세포작위뇨도조직공정충자세포화대범위뇨도결손수복제공료이론기출.