华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2012年
6期
1-4
,共4页
胡廷章%杨俊年%吴应梅%陈再刚
鬍廷章%楊俊年%吳應梅%陳再剛
호정장%양준년%오응매%진재강
胚胎发育后期丰富蛋白%OsLEA19a%蛋白表达%大肠杆菌%抗逆性
胚胎髮育後期豐富蛋白%OsLEA19a%蛋白錶達%大腸桿菌%抗逆性
배태발육후기봉부단백%OsLEA19a%단백표체%대장간균%항역성
根据胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA19a的读码框序列设计引物,PCR扩增目的基因后,利用基因重组技术成功构建原核表达载体pET30a-OsLEA19a,并将重组质粒转化到E.coli BL21中.优化诱导OsLEA19a表达的条件,使目的蛋白可在E.coli BL21中高效表达.OsLEA19a融合蛋白的SDS-PAGE电泳分析表明,诱导蛋白表达的最适条件是37℃、4h,融合蛋白的大小大约为30 kDa.抗逆性分析表明,OsLEA19a的表达能增强大肠杆菌对高盐、高渗透压、高温和低温等非生物胁迫的抗性.
根據胚胎髮育後期豐富蛋白基因OsLEA19a的讀碼框序列設計引物,PCR擴增目的基因後,利用基因重組技術成功構建原覈錶達載體pET30a-OsLEA19a,併將重組質粒轉化到E.coli BL21中.優化誘導OsLEA19a錶達的條件,使目的蛋白可在E.coli BL21中高效錶達.OsLEA19a融閤蛋白的SDS-PAGE電泳分析錶明,誘導蛋白錶達的最適條件是37℃、4h,融閤蛋白的大小大約為30 kDa.抗逆性分析錶明,OsLEA19a的錶達能增彊大腸桿菌對高鹽、高滲透壓、高溫和低溫等非生物脅迫的抗性.
근거배태발육후기봉부단백기인OsLEA19a적독마광서렬설계인물,PCR확증목적기인후,이용기인중조기술성공구건원핵표체재체pET30a-OsLEA19a,병장중조질립전화도E.coli BL21중.우화유도OsLEA19a표체적조건,사목적단백가재E.coli BL21중고효표체.OsLEA19a융합단백적SDS-PAGE전영분석표명,유도단백표체적최괄조건시37℃、4h,융합단백적대소대약위30 kDa.항역성분석표명,OsLEA19a적표체능증강대장간균대고염、고삼투압、고온화저온등비생물협박적항성.
