临床泌尿外科杂志
臨床泌尿外科雜誌
림상비뇨외과잡지
JOURNAL OF CLINICAL UROLOGY
2011年
7期
488-492
,共5页
文博%李晓铭%黄丽兴%黄小佳%李春%冯海航%余贵亮
文博%李曉銘%黃麗興%黃小佳%李春%馮海航%餘貴亮
문박%리효명%황려흥%황소가%리춘%풍해항%여귀량
前列腺肿瘤%Survivin启动子%条件复制型腺病毒
前列腺腫瘤%Survivin啟動子%條件複製型腺病毒
전렬선종류%Survivin계동자%조건복제형선병독
目的:构建携带有Survivin启动子和报告基因的条件复制型腺病毒并观察该病毒对前列腺癌细胞的特异性溶瘤作用.方法:以前列腺癌细胞系LNCaP细胞全基因组DAN为模板,PCR扩增Survivin启动子,构建pGL3BSurvivin质粒表达载体,荧光素酶检测系统观察前列腺癌细胞中Survivin启动子活性.将pGL3BSurvivin亚克隆至穿梭质粒pShuttle中,构建含有Survivin启动子的重组腺病毒reADGL3BSurvivin.转染HEK293细胞进行重组病毒的扩增、纯化和滴度检测.利用CCK-8法检测重组腺病毒对前列腺癌细胞的生长抑制作用,以正常前列腺细胞为对照.结果:经多种限制性内切酶酶切、PCR及测序鉴定,证实成功构建了含Survivin启动子报告基因质粒表达载体.荧光素酶报告基因检测结果表明前列腺癌细胞内Survivin启动子活性明显高于正常细胞组.同时也证实成功构建了含Survivin启动子和报告基因的腺病毒载体；CCK-8结果显示reADGL3BSurvivin可有效抑制前列腺癌细胞增殖而对正常细胞无增殖抑制作用.结论:成功构建含Survivin启动子的条件复制型腺病毒具有选择性杀伤前列腺癌细胞的能力,实验结果为前列腺癌靶向治疗提供了良好的条件复制型病毒载体及新的治疗策略.
目的:構建攜帶有Survivin啟動子和報告基因的條件複製型腺病毒併觀察該病毒對前列腺癌細胞的特異性溶瘤作用.方法:以前列腺癌細胞繫LNCaP細胞全基因組DAN為模闆,PCR擴增Survivin啟動子,構建pGL3BSurvivin質粒錶達載體,熒光素酶檢測繫統觀察前列腺癌細胞中Survivin啟動子活性.將pGL3BSurvivin亞剋隆至穿梭質粒pShuttle中,構建含有Survivin啟動子的重組腺病毒reADGL3BSurvivin.轉染HEK293細胞進行重組病毒的擴增、純化和滴度檢測.利用CCK-8法檢測重組腺病毒對前列腺癌細胞的生長抑製作用,以正常前列腺細胞為對照.結果:經多種限製性內切酶酶切、PCR及測序鑒定,證實成功構建瞭含Survivin啟動子報告基因質粒錶達載體.熒光素酶報告基因檢測結果錶明前列腺癌細胞內Survivin啟動子活性明顯高于正常細胞組.同時也證實成功構建瞭含Survivin啟動子和報告基因的腺病毒載體；CCK-8結果顯示reADGL3BSurvivin可有效抑製前列腺癌細胞增殖而對正常細胞無增殖抑製作用.結論:成功構建含Survivin啟動子的條件複製型腺病毒具有選擇性殺傷前列腺癌細胞的能力,實驗結果為前列腺癌靶嚮治療提供瞭良好的條件複製型病毒載體及新的治療策略.
목적:구건휴대유Survivin계동자화보고기인적조건복제형선병독병관찰해병독대전렬선암세포적특이성용류작용.방법:이전렬선암세포계LNCaP세포전기인조DAN위모판,PCR확증Survivin계동자,구건pGL3BSurvivin질립표체재체,형광소매검측계통관찰전렬선암세포중Survivin계동자활성.장pGL3BSurvivin아극륭지천사질립pShuttle중,구건함유Survivin계동자적중조선병독reADGL3BSurvivin.전염HEK293세포진행중조병독적확증、순화화적도검측.이용CCK-8법검측중조선병독대전렬선암세포적생장억제작용,이정상전렬선세포위대조.결과:경다충한제성내절매매절、PCR급측서감정,증실성공구건료함Survivin계동자보고기인질립표체재체.형광소매보고기인검측결과표명전렬선암세포내Survivin계동자활성명현고우정상세포조.동시야증실성공구건료함Survivin계동자화보고기인적선병독재체；CCK-8결과현시reADGL3BSurvivin가유효억제전렬선암세포증식이대정상세포무증식억제작용.결론:성공구건함Survivin계동자적조건복제형선병독구유선택성살상전렬선암세포적능력,실험결과위전렬선암파향치료제공료량호적조건복제형병독재체급신적치료책략.
