福建农业学报
福建農業學報
복건농업학보
FUJIAN JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
11期
1178-1182
,共5页
陈华%姜宝杰%张冲%曾建斌%邓烨%庄伟建
陳華%薑寶傑%張遲%曾建斌%鄧燁%莊偉建
진화%강보걸%장충%증건빈%산엽%장위건
SMART法%全长cDNA文库%花生种皮
SMART法%全長cDNA文庫%花生種皮
SMART법%전장cDNA문고%화생충피
SMART法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一.在研究多种构建全长cDNA文库的方法基础上,吸收和改进了SMART法,对特异引物和PCR条件进行可行性的优化,成功构建了高质量的花生种皮全长cDNA文库,改进后的方法更经济、简便易行.经过涂平板测定和酶切反应快速鉴定表明,原始文库的滴度为1.23×106 cfu·mL-1,重组率达93.3％,全长率为59％.插入片段大小多在1.0～2.0 kb,所占比例为70％,平均大小在1.1 kb左右,采用涂平板均匀扩增得到的扩增文库滴度达到了3.84×109 cfu·mL-1,可用于长期保存.
SMART法是目前全長cDNA文庫構建的重要方法之一.在研究多種構建全長cDNA文庫的方法基礎上,吸收和改進瞭SMART法,對特異引物和PCR條件進行可行性的優化,成功構建瞭高質量的花生種皮全長cDNA文庫,改進後的方法更經濟、簡便易行.經過塗平闆測定和酶切反應快速鑒定錶明,原始文庫的滴度為1.23×106 cfu·mL-1,重組率達93.3％,全長率為59％.插入片段大小多在1.0～2.0 kb,所佔比例為70％,平均大小在1.1 kb左右,採用塗平闆均勻擴增得到的擴增文庫滴度達到瞭3.84×109 cfu·mL-1,可用于長期保存.
SMART법시목전전장cDNA문고구건적중요방법지일.재연구다충구건전장cDNA문고적방법기출상,흡수화개진료SMART법,대특이인물화PCR조건진행가행성적우화,성공구건료고질량적화생충피전장cDNA문고,개진후적방법경경제、간편역행.경과도평판측정화매절반응쾌속감정표명,원시문고적적도위1.23×106 cfu·mL-1,중조솔체93.3％,전장솔위59％.삽입편단대소다재1.0～2.0 kb,소점비례위70％,평균대소재1.1 kb좌우,채용도평판균균확증득도적확증문고적도체도료3.84×109 cfu·mL-1,가용우장기보존.
