西南师范大学学报（自然科学版）
西南師範大學學報（自然科學版）
서남사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SOUTHWEST CHINA NORMAL UNIVERSITY
2012年
12期
78-82
,共5页
袁军%倪丹%方遂%王荣智
袁軍%倪丹%方遂%王榮智
원군%예단%방수%왕영지
副溶血弧菌%Ⅲ型分泌系统%VopS%基因克隆%蛋白表达
副溶血弧菌%Ⅲ型分泌繫統%VopS%基因剋隆%蛋白錶達
부용혈호균%Ⅲ형분비계통%VopS%기인극륭%단백표체
副溶血弧菌可通过Ⅲ型分泌系统分泌效应毒力蛋白导致真核靶细胞的细胞溶解及细胞凋亡.VopS是Ⅲ型分泌系统中的一个效应毒力因子,能通过抑制NF-κB的活性介导巨噬细胞死亡.实验将效应因子VopS的编码基因克隆到pET28a(+)载体上,成功构建了pET28a(+)-vopS重组质粒,将该质粒转入大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达,经SDS-PAGE分析,发现在分子量约为43 kDa处有一明显蛋白表达条带.用Ni2+-NTA柱亲和层析获得纯化蛋白,浓度为175 mg/L.为进一步研究副溶血弧菌Ⅲ型分泌系统致病机制提供了材料.
副溶血弧菌可通過Ⅲ型分泌繫統分泌效應毒力蛋白導緻真覈靶細胞的細胞溶解及細胞凋亡.VopS是Ⅲ型分泌繫統中的一箇效應毒力因子,能通過抑製NF-κB的活性介導巨噬細胞死亡.實驗將效應因子VopS的編碼基因剋隆到pET28a(+)載體上,成功構建瞭pET28a(+)-vopS重組質粒,將該質粒轉入大腸桿菌BL21 (DE3)中誘導錶達,經SDS-PAGE分析,髮現在分子量約為43 kDa處有一明顯蛋白錶達條帶.用Ni2+-NTA柱親和層析穫得純化蛋白,濃度為175 mg/L.為進一步研究副溶血弧菌Ⅲ型分泌繫統緻病機製提供瞭材料.
부용혈호균가통과Ⅲ형분비계통분비효응독력단백도치진핵파세포적세포용해급세포조망.VopS시Ⅲ형분비계통중적일개효응독력인자,능통과억제NF-κB적활성개도거서세포사망.실험장효응인자VopS적편마기인극륭도pET28a(+)재체상,성공구건료pET28a(+)-vopS중조질립,장해질립전입대장간균BL21 (DE3)중유도표체,경SDS-PAGE분석,발현재분자량약위43 kDa처유일명현단백표체조대.용Ni2+-NTA주친화층석획득순화단백,농도위175 mg/L.위진일보연구부용혈호균Ⅲ형분비계통치병궤제제공료재료.
