CAJ | 학술논문

为比较不同长度的插入片段对质粒标准分子储存稳定性的影响,本研究在pEASY-T3质粒载体的基础上,构建了插入片段长度分别为186 bp(含Cry1Ab)、273 bp(含Cry1Ab和SPS)、880bp(含Cry1Ab、SPS 、fsA CP、35S、NOS和NPTII)的质粒标准分子(以下简称186、273和880).利用荧光定量PCR技术分析3个质粒标准分子中不同基因片段在不同存储温度(-70、-20和4℃)和不同存储时间(1、3、7、14、21、28 d和3、6、12个月)时的稳定性差异.结果表明:Cry1Ab的Cq(quantification cycle)值在质粒186和273中在所有3个温度条件下6个月内均保持稳定,而在12个月时,Cq值快速上升,显著高于其他时期(P＜0.05)；而在质粒880中的Cry1Ab的Cq值在各温度下稳定3个月就快速升高,显著高于其他时期(P＜0.05).SPS的Cq值在质粒273中在3个温度下能稳定保持6个月,SPS、fsA CP、35S、NOS和NPTII片段的Cq值在质粒880中仅能稳定保持3个月.研究结果表明:含较短插入片段的质粒标准分子的稳定性高于含较长插入片段的质粒标准分子,且同一质粒标准分子中不同片段间的稳定性也存在差异.研究为质粒标准分子储存稳定性(保质期)的研究提供科学依据,同时为质粒标准分子候选物的选择提供实验参考.
위비교불동장도적삽입편단대질립표준분자저존은정성적영향,본연구재pEASY-T3질립재체적기출상,구건료삽입편단장도분별위186 bp(함Cry1Ab)、273 bp(함Cry1Ab화SPS)、880bp(함Cry1Ab、SPS 、fsA CP、35S、NOS화NPTII)적질립표준분자(이하간칭186、273화880).이용형광정량PCR기술분석3개질립표준분자중불동기인편단재불동존저온도(-70、-20화4℃)화불동존저시간(1、3、7、14、21、28 d화3、6、12개월)시적은정성차이.결과표명:Cry1Ab적Cq(quantification cycle)치재질립186화273중재소유3개온도조건하6개월내균보지은정,이재12개월시,Cq치쾌속상승,현저고우기타시기(P＜0.05)；이재질립880중적Cry1Ab적Cq치재각온도하은정3개월취쾌속승고,현저고우기타시기(P＜0.05).SPS적Cq치재질립273중재3개온도하능은정보지6개월,SPS、fsA CP、35S、NOS화NPTII편단적Cq치재질립880중부능은정보지3개월.연구결과표명:함교단삽입편단적질립표준분자적은정성고우함교장삽입편단적질립표준분자,차동일질립표준분자중불동편단간적은정성야존재차이.연구위질립표준분자저존은정성(보질기)적연구제공과학의거,동시위질립표준분자후선물적선택제공실험삼고.