天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2012年
12期
1222-1225
,共4页
刘丹%尹东%孙惦%许旻%何明
劉丹%尹東%孫惦%許旻%何明
류단%윤동%손점%허민%하명
脂多糖类%肌细胞%心脏%创伤和损伤%基因,肿瘤抑制%bcl-2相关X蛋白质%14-3-3蛋白质类
脂多糖類%肌細胞%心髒%創傷和損傷%基因,腫瘤抑製%bcl-2相關X蛋白質%14-3-3蛋白質類
지다당류%기세포%심장%창상화손상%기인,종류억제%bcl-2상관X단백질%14-3-3단백질류
目的:探讨14-3-3γ对脂多糖(LPS)所致心肌损伤的作用与抑制Bax向线粒体移位的关系.方法:采用原代SD乳鼠心肌细胞,随机分为4组:对照组;LPS组,LPS 10 mg/L加至培养基中6 h;pFLAG+LPS组,空载质粒pFLAG转染至心肌细胞,24 h后处理同LPS组;pFLAG-14-3-3γ+LPS组,重组质粒pFLAG-14-3-3γ转染至心肌细胞,24 h后处理同LPS组.四唑盐(MTT)比色法检测各组细胞存活率,全自动生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸酶(CPK)值,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blotting检测细胞14-3-3γ蛋白水平、细胞浆及线粒体的Bax蛋白水平.结果:LPS致心肌细胞损伤,与对照组相比,LPS处理使细胞存活率明显下降(P＜0.01),LDH、CPK值明显升高(P＜0.01),细胞凋亡率增加(P＜0.01),促使Bax蛋白从胞浆向线粒体移位,转染重组质粒pFLAG-14-3-3γ使14-3-3γ在心肌细胞内高表达后可明显逆转LPS所致的损伤,上述各指标均有所改善,并抑制Bax蛋白向线粒体的移位.结论:14-3-3γ对抗LPS所致心肌细胞损伤与抑制Bax从胞浆向线粒体移位有关.
目的:探討14-3-3γ對脂多糖(LPS)所緻心肌損傷的作用與抑製Bax嚮線粒體移位的關繫.方法:採用原代SD乳鼠心肌細胞,隨機分為4組:對照組;LPS組,LPS 10 mg/L加至培養基中6 h;pFLAG+LPS組,空載質粒pFLAG轉染至心肌細胞,24 h後處理同LPS組;pFLAG-14-3-3γ+LPS組,重組質粒pFLAG-14-3-3γ轉染至心肌細胞,24 h後處理同LPS組.四唑鹽(MTT)比色法檢測各組細胞存活率,全自動生化分析儀檢測乳痠脫氫酶(LDH)、肌痠燐痠酶(CPK)值,流式細胞儀檢測細胞凋亡率,Western blotting檢測細胞14-3-3γ蛋白水平、細胞漿及線粒體的Bax蛋白水平.結果:LPS緻心肌細胞損傷,與對照組相比,LPS處理使細胞存活率明顯下降(P＜0.01),LDH、CPK值明顯升高(P＜0.01),細胞凋亡率增加(P＜0.01),促使Bax蛋白從胞漿嚮線粒體移位,轉染重組質粒pFLAG-14-3-3γ使14-3-3γ在心肌細胞內高錶達後可明顯逆轉LPS所緻的損傷,上述各指標均有所改善,併抑製Bax蛋白嚮線粒體的移位.結論:14-3-3γ對抗LPS所緻心肌細胞損傷與抑製Bax從胞漿嚮線粒體移位有關.
목적:탐토14-3-3γ대지다당(LPS)소치심기손상적작용여억제Bax향선립체이위적관계.방법:채용원대SD유서심기세포,수궤분위4조:대조조;LPS조,LPS 10 mg/L가지배양기중6 h;pFLAG+LPS조,공재질립pFLAG전염지심기세포,24 h후처리동LPS조;pFLAG-14-3-3γ+LPS조,중조질립pFLAG-14-3-3γ전염지심기세포,24 h후처리동LPS조.사서염(MTT)비색법검측각조세포존활솔,전자동생화분석의검측유산탈경매(LDH)、기산린산매(CPK)치,류식세포의검측세포조망솔,Western blotting검측세포14-3-3γ단백수평、세포장급선립체적Bax단백수평.결과:LPS치심기세포손상,여대조조상비,LPS처리사세포존활솔명현하강(P＜0.01),LDH、CPK치명현승고(P＜0.01),세포조망솔증가(P＜0.01),촉사Bax단백종포장향선립체이위,전염중조질립pFLAG-14-3-3γ사14-3-3γ재심기세포내고표체후가명현역전LPS소치적손상,상술각지표균유소개선,병억제Bax단백향선립체적이위.결론:14-3-3γ대항LPS소치심기세포손상여억제Bax종포장향선립체이위유관.
