生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
12期
167-172
,共6页
P2X7受体%短肽%单克隆抗体
P2X7受體%短肽%單剋隆抗體
P2X7수체%단태%단극륭항체
旨在制备与鉴定鼠抗P2X7受体的蛋白单克隆抗体.以人P2X7受体的胞外段制备短肽作为抗原,皮下注射免疫Balb/c小鼠.分离小鼠脾脏B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合并培养,挑选阳性杂交瘤细胞,扩大培养,制备和鉴定P2X7其生物学效应.结果显示,获得1株稳定分泌抗人P2X7受体的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗类型重链为IgG1,轻链为κ；该株杂交瘤细胞腹水效价为1∶6.4×104；传30代及液氮中保存6个月,抗体效价稳定；Western blotting检测证明该单抗与人细胞表面的P2X7受体蛋白特异地结合.所制备的抗人P2X7受体的单克隆抗体具有高度的特异性及稳定性,为针对P2X7受体为靶点的抗体药物的开发应用、疾病的辅助诊断奠定了基础.
旨在製備與鑒定鼠抗P2X7受體的蛋白單剋隆抗體.以人P2X7受體的胞外段製備短肽作為抗原,皮下註射免疫Balb/c小鼠.分離小鼠脾髒B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融閤併培養,挑選暘性雜交瘤細胞,擴大培養,製備和鑒定P2X7其生物學效應.結果顯示,穫得1株穩定分泌抗人P2X7受體的單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,所分泌的單抗類型重鏈為IgG1,輕鏈為κ；該株雜交瘤細胞腹水效價為1∶6.4×104；傳30代及液氮中保存6箇月,抗體效價穩定；Western blotting檢測證明該單抗與人細胞錶麵的P2X7受體蛋白特異地結閤.所製備的抗人P2X7受體的單剋隆抗體具有高度的特異性及穩定性,為針對P2X7受體為靶點的抗體藥物的開髮應用、疾病的輔助診斷奠定瞭基礎.
지재제비여감정서항P2X7수체적단백단극륭항체.이인P2X7수체적포외단제비단태작위항원,피하주사면역Balb/c소서.분리소서비장B림파세포여골수류세포융합병배양,도선양성잡교류세포,확대배양,제비화감정P2X7기생물학효응.결과현시,획득1주은정분비항인P2X7수체적단극륭항체적잡교류세포주,소분비적단항류형중련위IgG1,경련위κ；해주잡교류세포복수효개위1∶6.4×104；전30대급액담중보존6개월,항체효개은정；Western blotting검측증명해단항여인세포표면적P2X7수체단백특이지결합.소제비적항인P2X7수체적단극륭항체구유고도적특이성급은정성,위침대P2X7수체위파점적항체약물적개발응용、질병적보조진단전정료기출.
