南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
12期
1713-1717
,共5页
宋远斌%何思杰%余楠%陈欣欣%王斌%车小燕%曾其毅
宋遠斌%何思傑%餘楠%陳訢訢%王斌%車小燕%曾其毅
송원빈%하사걸%여남%진흔흔%왕빈%차소연%증기의
柯萨奇病毒A16型%VP1蛋白%VP2蛋白%VP3蛋白%VP4蛋白%克隆%原核表达%抗原反应性
柯薩奇病毒A16型%VP1蛋白%VP2蛋白%VP3蛋白%VP4蛋白%剋隆%原覈錶達%抗原反應性
가살기병독A16형%VP1단백%VP2단백%VP3단백%VP4단백%극륭%원핵표체%항원반응성
目的 克隆并表达柯萨奇病毒A16型VP1～VP4蛋白基因,初步分析其抗原相关性.方法 抽提病毒RNA,经RT-PCR方法分别扩增出VP1～VP4蛋白基因片段,经克隆后,在QIA表达系统中表达,表达产物经8 mol/L尿素洗涤及镍柱亲和层析纯化后,用柯萨奇病毒A16型病毒免疫兔血清及肠道病毒7 1型病毒免疫兔血清对重组蛋白进行Western blotting及ELISA分析其抗原相关性及交叉反应性.结果 成功构建的重组质粒pQE30a/VP1～VP4并经IPTG诱导,重组蛋白VP1～VP4高效表达并纯化成功,经Western blotting及ELISA证实重组蛋白VP1～VP4可以被CVA16免疫兔血清特异识别,部分与肠道病毒71型免疫血清存在交叉反应.结论 在大肠杆菌M15中高效表达出柯萨奇病毒A16型VP1～VP4蛋白,经纯化产物具有较强的抗原反应性.
目的 剋隆併錶達柯薩奇病毒A16型VP1～VP4蛋白基因,初步分析其抗原相關性.方法 抽提病毒RNA,經RT-PCR方法分彆擴增齣VP1～VP4蛋白基因片段,經剋隆後,在QIA錶達繫統中錶達,錶達產物經8 mol/L尿素洗滌及鎳柱親和層析純化後,用柯薩奇病毒A16型病毒免疫兔血清及腸道病毒7 1型病毒免疫兔血清對重組蛋白進行Western blotting及ELISA分析其抗原相關性及交扠反應性.結果 成功構建的重組質粒pQE30a/VP1～VP4併經IPTG誘導,重組蛋白VP1～VP4高效錶達併純化成功,經Western blotting及ELISA證實重組蛋白VP1～VP4可以被CVA16免疫兔血清特異識彆,部分與腸道病毒71型免疫血清存在交扠反應.結論 在大腸桿菌M15中高效錶達齣柯薩奇病毒A16型VP1～VP4蛋白,經純化產物具有較彊的抗原反應性.
목적 극륭병표체가살기병독A16형VP1～VP4단백기인,초보분석기항원상관성.방법 추제병독RNA,경RT-PCR방법분별확증출VP1～VP4단백기인편단,경극륭후,재QIA표체계통중표체,표체산물경8 mol/L뇨소세조급얼주친화층석순화후,용가살기병독A16형병독면역토혈청급장도병독7 1형병독면역토혈청대중조단백진행Western blotting급ELISA분석기항원상관성급교차반응성.결과 성공구건적중조질립pQE30a/VP1～VP4병경IPTG유도,중조단백VP1～VP4고효표체병순화성공,경Western blotting급ELISA증실중조단백VP1～VP4가이피CVA16면역토혈청특이식별,부분여장도병독71형면역혈청존재교차반응.결론 재대장간균M15중고효표체출가살기병독A16형VP1～VP4단백,경순화산물구유교강적항원반응성.
