南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
12期
1695-1698
,共4页
董伟%戚孟春%邓久鹏%陈洪伟%冯晓洁%廖囡囡
董偉%慼孟春%鄧久鵬%陳洪偉%馮曉潔%廖囡囡
동위%척맹춘%산구붕%진홍위%풍효길%료닙닙
成骨细胞%阿仑膦酸盐%碱性磷酸酶%核因子κB受体激动剂配体%骨保护素
成骨細胞%阿崙膦痠鹽%堿性燐痠酶%覈因子κB受體激動劑配體%骨保護素
성골세포%아륜련산염%감성린산매%핵인자κB수체격동제배체%골보호소
目的 研究阿仑膦酸盐(ALN)对体外培养小鼠成骨细胞相关基因OPG、RANKL表达的影响.方法 体外培养小鼠成骨细胞,应用碱性磷酸酶染色(ALP)检测成骨细胞ALP染色情况,免疫荧光化学检测成骨细胞RANKL、OPG表达.将第二代成骨细胞分为A、B、C、D、E五组.A组(对照组),用DMEM培养基培养；B、C、D、E组除加入上述培养基外,加入不同浓度ALN,分别为:B组,加入10-4 mol/L ALN;C组,加入10-5mol/L ALN;D组,加入10-6 mol/L ALN;E组,加入10-7mol/L ALN.培养48h后应用Real time PCR、Western blot检测各组成骨细胞基因RANKL、OPG表达情况.结果 成骨细胞ALP染色呈阳性,免疫荧光化学检测RANKL、OPG表达阳性.Real time PCR、Western Blot检测各组OPG、RANKL mRNA及蛋白表达水平与ALN浓度密切相关,10-4 mol/L ALN时OPG、RANKL表达最低,10-7～10-5 mol/L ALN时OPG、RANKL表达依次增高,10-5mol/L ALN时表达量最高.结论ALN对小鼠成骨细胞RANKL、OPG的表达产生作用:10-4 mol/L时明显抑制成骨细胞RANKL、OPG的表达；浓度10-5、10-6、10-7 mol/L ALN促进成骨细胞RANKL、OPG的表达,其中10-5 mol/L ALN促进作用最强.
目的 研究阿崙膦痠鹽(ALN)對體外培養小鼠成骨細胞相關基因OPG、RANKL錶達的影響.方法 體外培養小鼠成骨細胞,應用堿性燐痠酶染色(ALP)檢測成骨細胞ALP染色情況,免疫熒光化學檢測成骨細胞RANKL、OPG錶達.將第二代成骨細胞分為A、B、C、D、E五組.A組(對照組),用DMEM培養基培養；B、C、D、E組除加入上述培養基外,加入不同濃度ALN,分彆為:B組,加入10-4 mol/L ALN;C組,加入10-5mol/L ALN;D組,加入10-6 mol/L ALN;E組,加入10-7mol/L ALN.培養48h後應用Real time PCR、Western blot檢測各組成骨細胞基因RANKL、OPG錶達情況.結果 成骨細胞ALP染色呈暘性,免疫熒光化學檢測RANKL、OPG錶達暘性.Real time PCR、Western Blot檢測各組OPG、RANKL mRNA及蛋白錶達水平與ALN濃度密切相關,10-4 mol/L ALN時OPG、RANKL錶達最低,10-7～10-5 mol/L ALN時OPG、RANKL錶達依次增高,10-5mol/L ALN時錶達量最高.結論ALN對小鼠成骨細胞RANKL、OPG的錶達產生作用:10-4 mol/L時明顯抑製成骨細胞RANKL、OPG的錶達；濃度10-5、10-6、10-7 mol/L ALN促進成骨細胞RANKL、OPG的錶達,其中10-5 mol/L ALN促進作用最彊.
목적 연구아륜련산염(ALN)대체외배양소서성골세포상관기인OPG、RANKL표체적영향.방법 체외배양소서성골세포,응용감성린산매염색(ALP)검측성골세포ALP염색정황,면역형광화학검측성골세포RANKL、OPG표체.장제이대성골세포분위A、B、C、D、E오조.A조(대조조),용DMEM배양기배양；B、C、D、E조제가입상술배양기외,가입불동농도ALN,분별위:B조,가입10-4 mol/L ALN;C조,가입10-5mol/L ALN;D조,가입10-6 mol/L ALN;E조,가입10-7mol/L ALN.배양48h후응용Real time PCR、Western blot검측각조성골세포기인RANKL、OPG표체정황.결과 성골세포ALP염색정양성,면역형광화학검측RANKL、OPG표체양성.Real time PCR、Western Blot검측각조OPG、RANKL mRNA급단백표체수평여ALN농도밀절상관,10-4 mol/L ALN시OPG、RANKL표체최저,10-7～10-5 mol/L ALN시OPG、RANKL표체의차증고,10-5mol/L ALN시표체량최고.결론ALN대소서성골세포RANKL、OPG적표체산생작용:10-4 mol/L시명현억제성골세포RANKL、OPG적표체；농도10-5、10-6、10-7 mol/L ALN촉진성골세포RANKL、OPG적표체,기중10-5 mol/L ALN촉진작용최강.
