中国食品工业
中國食品工業
중국식품공업
CHINA FOOD INDUSTRY
2013年
11期
49-52
,共4页
李志忠%马瑾%王芳%廖世奇%马宁%杨楠
李誌忠%馬瑾%王芳%廖世奇%馬寧%楊楠
리지충%마근%왕방%료세기%마저%양남
磁珠%SELEX%技术%实时定量PCR%HIV-P24%核酸适配体
磁珠%SELEX%技術%實時定量PCR%HIV-P24%覈痠適配體
자주%SELEX%기술%실시정량PCR%HIV-P24%핵산괄배체
目的:利用磁珠作为载体,建立快速HIV-P24核酸适配体的SELEX筛选方法.方法:利用SELEX技术、磁珠分离及实时定量PCR技术,从随机寡核苷酸库中快速筛选出能与HIV-P24特异结合的寡核苷酸,利用凝胶阻滞实验鉴定所筛选到的HIV-P24核酸适配体复合物,通过连接Pmdl8-Tvector,转化E.ColiDH5a感受态细胞得到了阳性克隆.结果:经过4轮筛选并运用凝胶阻滞实验验证了HIV-P24核酸适配体复合物条带明显被阻滞,利用交错PCR鉴定了所挑取的阳性克隆,也得到了测序序列.结论:利用SELEX技术、磁珠核酸分离技术和实时定量PCR技术成功筛选到了2条能与HIV-P24特异性结合的核酸适配体,这几种方法相结合操作简单、能有效提高筛选效率,并且便于机械化操作,为今后的适配体筛选打下良好基础.
目的:利用磁珠作為載體,建立快速HIV-P24覈痠適配體的SELEX篩選方法.方法:利用SELEX技術、磁珠分離及實時定量PCR技術,從隨機寡覈苷痠庫中快速篩選齣能與HIV-P24特異結閤的寡覈苷痠,利用凝膠阻滯實驗鑒定所篩選到的HIV-P24覈痠適配體複閤物,通過連接Pmdl8-Tvector,轉化E.ColiDH5a感受態細胞得到瞭暘性剋隆.結果:經過4輪篩選併運用凝膠阻滯實驗驗證瞭HIV-P24覈痠適配體複閤物條帶明顯被阻滯,利用交錯PCR鑒定瞭所挑取的暘性剋隆,也得到瞭測序序列.結論:利用SELEX技術、磁珠覈痠分離技術和實時定量PCR技術成功篩選到瞭2條能與HIV-P24特異性結閤的覈痠適配體,這幾種方法相結閤操作簡單、能有效提高篩選效率,併且便于機械化操作,為今後的適配體篩選打下良好基礎.
목적:이용자주작위재체,건립쾌속HIV-P24핵산괄배체적SELEX사선방법.방법:이용SELEX기술、자주분리급실시정량PCR기술,종수궤과핵감산고중쾌속사선출능여HIV-P24특이결합적과핵감산,이용응효조체실험감정소사선도적HIV-P24핵산괄배체복합물,통과련접Pmdl8-Tvector,전화E.ColiDH5a감수태세포득도료양성극륭.결과:경과4륜사선병운용응효조체실험험증료HIV-P24핵산괄배체복합물조대명현피조체,이용교착PCR감정료소도취적양성극륭,야득도료측서서렬.결론:이용SELEX기술、자주핵산분리기술화실시정량PCR기술성공사선도료2조능여HIV-P24특이성결합적핵산괄배체,저궤충방법상결합조작간단、능유효제고사선효솔,병차편우궤계화조작,위금후적괄배체사선타하량호기출.
