国外畜牧学-猪与禽
國外畜牧學-豬與禽
국외축목학-저여금
PIGS AND POULTRY
2013年
12期
74-76,82
,共4页
杨明%贺泂杰%郭慧琳%贺奋义%陈伯祥
楊明%賀泂傑%郭慧琳%賀奮義%陳伯祥
양명%하형걸%곽혜림%하강의%진백상
鸽新城疫%F基因,毕赤酵母%载体构建
鴿新城疫%F基因,畢赤酵母%載體構建
합신성역%F기인,필적효모%재체구건
应用特异性引物,从鸽新城疫F基因重组质粒pMD-18T-PPMV-1-F中PCR扩增F基因,用EcoRⅠ和Not Ⅰ分别对扩增产物和酵母表达质粒pPIC9K进行双酶切,将F基因定向克隆到pPIC9K的EcoR Ⅰ和Not Ⅰ位点,构建重组质粒pPIC9K-PPMV-1-F,对重组质粒鉴定后用SalⅠ酶切使其线性化,电击转化至感受态毕赤酵母GS115菌中,影印接种法筛选G418抗性菌株,提取酵母染色体DNA进行PCR鉴定,筛选出鸽新城疫F基因的高拷贝重组菌株.
應用特異性引物,從鴿新城疫F基因重組質粒pMD-18T-PPMV-1-F中PCR擴增F基因,用EcoRⅠ和Not Ⅰ分彆對擴增產物和酵母錶達質粒pPIC9K進行雙酶切,將F基因定嚮剋隆到pPIC9K的EcoR Ⅰ和Not Ⅰ位點,構建重組質粒pPIC9K-PPMV-1-F,對重組質粒鑒定後用SalⅠ酶切使其線性化,電擊轉化至感受態畢赤酵母GS115菌中,影印接種法篩選G418抗性菌株,提取酵母染色體DNA進行PCR鑒定,篩選齣鴿新城疫F基因的高拷貝重組菌株.
응용특이성인물,종합신성역F기인중조질립pMD-18T-PPMV-1-F중PCR확증F기인,용EcoRⅠ화Not Ⅰ분별대확증산물화효모표체질립pPIC9K진행쌍매절,장F기인정향극륭도pPIC9K적EcoR Ⅰ화Not Ⅰ위점,구건중조질립pPIC9K-PPMV-1-F,대중조질립감정후용SalⅠ매절사기선성화,전격전화지감수태필적효모GS115균중,영인접충법사선G418항성균주,제취효모염색체DNA진행PCR감정,사선출합신성역F기인적고고패중조균주.
