水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2012年
3期
420-425
,共6页
高恶斌%李三华%吕波%张奇亚
高噁斌%李三華%呂波%張奇亞
고악빈%리삼화%려파%장기아
丝状蓝藻病毒(PaV-LD)%噬藻体感染性%蓝藻细胞裂解%半连续培养%稀释培养计数(MPN)
絲狀藍藻病毒(PaV-LD)%噬藻體感染性%藍藻細胞裂解%半連續培養%稀釋培養計數(MPN)
사상람조병독(PaV-LD)%서조체감염성%람조세포렬해%반련속배양%희석배양계수(MPN)
在从武汉东湖水样中培养分离水华蓝藻噬藻体 (Planktothrix agardhii Virus from Lake Donghu,PaV-LD) 的基础上,对在不同条件培养的宿主蓝藻细胞中,PaV-LD 增殖效率及裂解作用进行了测定分析.分别将PaV-LD 接种到生长期、半连续培养更新率或光照不同的宿主蓝藻液中,并采用稀释培养计数 (Mostprobable number,MPN) 方法与电镜观察,测定子代PaV-LD 释放量及宿主细胞的裂解作用.结果显示:对数生长期宿主蓝藻单个细胞中子代PaV-LD 的平均释放量为350 感染单位(Infectious Units,IU/cell),显著高于稳定生长期的平均释放量110 IU/cell.在用新鲜培养基更新率为0%、35%、50%和65%的半连续培养宿主蓝藻中,接种PaV-LD 5d 之后,噬藻体的释放量分别约为50 IU/cell、70 IU/cell、220 IU/cell 或310 IU/cell,表明子代PaV-LD 释放率随培养基更新率的增加而显著提高.在光照条件下感染3-4d 后,宿主蓝藻细胞充分裂解,并释放大量子代PaV-LD,滴度可由初始7.00×103 IU/mL 快速增加到8.56×107IU/mL;但在遮光条件下,同样感染的蓝藻细胞未见裂解,也检测不到释放的子代噬藻体.电镜观察显示,在光照条件下感染的蓝藻细胞类囊体膜结构消失,而大量子代PaV-LD 颗粒主要分布在原有类囊体的部位.显然,宿主蓝藻细胞的培养条件和状态可能对获得噬藻体纯培养有决定性影响.
在從武漢東湖水樣中培養分離水華藍藻噬藻體 (Planktothrix agardhii Virus from Lake Donghu,PaV-LD) 的基礎上,對在不同條件培養的宿主藍藻細胞中,PaV-LD 增殖效率及裂解作用進行瞭測定分析.分彆將PaV-LD 接種到生長期、半連續培養更新率或光照不同的宿主藍藻液中,併採用稀釋培養計數 (Mostprobable number,MPN) 方法與電鏡觀察,測定子代PaV-LD 釋放量及宿主細胞的裂解作用.結果顯示:對數生長期宿主藍藻單箇細胞中子代PaV-LD 的平均釋放量為350 感染單位(Infectious Units,IU/cell),顯著高于穩定生長期的平均釋放量110 IU/cell.在用新鮮培養基更新率為0%、35%、50%和65%的半連續培養宿主藍藻中,接種PaV-LD 5d 之後,噬藻體的釋放量分彆約為50 IU/cell、70 IU/cell、220 IU/cell 或310 IU/cell,錶明子代PaV-LD 釋放率隨培養基更新率的增加而顯著提高.在光照條件下感染3-4d 後,宿主藍藻細胞充分裂解,併釋放大量子代PaV-LD,滴度可由初始7.00×103 IU/mL 快速增加到8.56×107IU/mL;但在遮光條件下,同樣感染的藍藻細胞未見裂解,也檢測不到釋放的子代噬藻體.電鏡觀察顯示,在光照條件下感染的藍藻細胞類囊體膜結構消失,而大量子代PaV-LD 顆粒主要分佈在原有類囊體的部位.顯然,宿主藍藻細胞的培養條件和狀態可能對穫得噬藻體純培養有決定性影響.
재종무한동호수양중배양분리수화람조서조체 (Planktothrix agardhii Virus from Lake Donghu,PaV-LD) 적기출상,대재불동조건배양적숙주람조세포중,PaV-LD 증식효솔급렬해작용진행료측정분석.분별장PaV-LD 접충도생장기、반련속배양경신솔혹광조불동적숙주람조액중,병채용희석배양계수 (Mostprobable number,MPN) 방법여전경관찰,측정자대PaV-LD 석방량급숙주세포적렬해작용.결과현시:대수생장기숙주람조단개세포중자대PaV-LD 적평균석방량위350 감염단위(Infectious Units,IU/cell),현저고우은정생장기적평균석방량110 IU/cell.재용신선배양기경신솔위0%、35%、50%화65%적반련속배양숙주람조중,접충PaV-LD 5d 지후,서조체적석방량분별약위50 IU/cell、70 IU/cell、220 IU/cell 혹310 IU/cell,표명자대PaV-LD 석방솔수배양기경신솔적증가이현저제고.재광조조건하감염3-4d 후,숙주람조세포충분렬해,병석방대양자대PaV-LD,적도가유초시7.00×103 IU/mL 쾌속증가도8.56×107IU/mL;단재차광조건하,동양감염적람조세포미견렬해,야검측불도석방적자대서조체.전경관찰현시,재광조조건하감염적람조세포류낭체막결구소실,이대양자대PaV-LD 과립주요분포재원유류낭체적부위.현연,숙주람조세포적배양조건화상태가능대획득서조체순배양유결정성영향.
