CAJ | 학술논문

伴侣蛋白CCT 在蛋白折叠、抗胁迫以及调节细胞生长等生理过程中担负重要作用.研究利用同源克隆和RACE 技术克隆了皱纹盘鲍伴侣蛋白CCTζ(HdhCCTζ)cDNA 全长序列,并对CCTζ基因的序列特征进行了分析.HdhCCTζ cDNA 序列长1960 bp,开放阅读框为1599 bp,编码532 个氨基酸,生物学软件推测其编码蛋白相对分子量为58.46 kD,等电点为6.53.BLAST 分析结果表明HdhCCTζ与哺乳动物、鸟和鱼类等物种的CCT 具有较高的同源性.生物信息学分析结果显示,HdhCCTζ蛋白序列中包含3 个典型的CCT 信号基序(35RTNLGPKGTLKML47,56LTKDGNVLLHEMQIQHP72 和84QDDITGDGT92)以及1 个腺苷三磷酸结合基序(89GDGTTS94).此外,在HdhCCTζ蛋白序列中还包含3 个糖基化位点(23NISA26,128NKSL131 and 234NVSL237).实时荧光定量PCR 检测结果显示,HdhCCTζ在皱纹盘鲍组织中为组成型表达,但主要集中在性腺、血淋巴和肝胰腺中表达.使用不同锌含量(6.69 mg/kg、33.85 mg/kg、710.63 mg/kg 和3462.5 mg/kg)的日粮来饲喂幼鲍20 周后,取其肝脏和血细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR 技术进行HdhCCTζ mRNA 的表达水平分析.分析结果显示,随着日粮中锌含量的增加,HdhCCTζ mRNA 在血淋巴和肝胰腺中的表达水平呈现上调的趋势.相比于锌适量组(33.85 mg/kg),过量的锌(3462.5 mg/kg)却能够下调HdhCCTζ mRNA 的表达水平.上述结果表明,HdhCCTζ的表达受到日粮中锌添加量的影响,而高表达量的HdhCCTζ可能在提高皱纹盘鲍机体抗胁迫过程中发挥重要作用.
반려단백CCT 재단백절첩、항협박이급조절세포생장등생리과정중담부중요작용.연구이용동원극륭화RACE 기술극륭료추문반포반려단백CCTζ(HdhCCTζ)cDNA 전장서렬,병대CCTζ기인적서렬특정진행료분석.HdhCCTζ cDNA 서렬장1960 bp,개방열독광위1599 bp,편마532 개안기산,생물학연건추측기편마단백상대분자량위58.46 kD,등전점위6.53.BLAST 분석결과표명HdhCCTζ여포유동물、조화어류등물충적CCT 구유교고적동원성.생물신식학분석결과현시,HdhCCTζ단백서렬중포함3 개전형적CCT 신호기서(35RTNLGPKGTLKML47,56LTKDGNVLLHEMQIQHP72 화84QDDITGDGT92)이급1 개선감삼린산결합기서(89GDGTTS94).차외,재HdhCCTζ단백서렬중환포함3 개당기화위점(23NISA26,128NKSL131 and 234NVSL237).실시형광정량PCR 검측결과현시,HdhCCTζ재추문반포조직중위조성형표체,단주요집중재성선、혈림파화간이선중표체.사용불동자함량(6.69 mg/kg、33.85 mg/kg、710.63 mg/kg 화3462.5 mg/kg)적일량래사위유포20 주후,취기간장화혈세포총RNA,이용실시형광정량PCR 기술진행HdhCCTζ mRNA 적표체수평분석.분석결과현시,수착일량중자함량적증가,HdhCCTζ mRNA 재혈림파화간이선중적표체수평정현상조적추세.상비우자괄량조(33.85 mg/kg),과량적자(3462.5 mg/kg)각능구하조HdhCCTζ mRNA 적표체수평.상술결과표명,HdhCCTζ적표체수도일량중자첨가량적영향,이고표체량적HdhCCTζ가능재제고추문반포궤체항협박과정중발휘중요작용.