徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2012年
11期
729-733
,共5页
金培生%沈才齐%李雪阳%张爱君%陶常波%李强%马志兵
金培生%瀋纔齊%李雪暘%張愛君%陶常波%李彊%馬誌兵
금배생%침재제%리설양%장애군%도상파%리강%마지병
结缔组织生长因子%成纤维细胞%RNA干扰%短发夹RNA%质粒
結締組織生長因子%成纖維細胞%RNA榦擾%短髮夾RNA%質粒
결체조직생장인자%성섬유세포%RNA간우%단발협RNA%질립
目的 构建结缔组织生长因子 (connective tissue growth factor,CTGF) 短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA) 重组质粒,研究其在人皮肤瘢痕成纤维细胞中对CTGF基因表达的沉默效果,为探讨病理性瘢痕的基因治疗奠定基础.方法 设计针对人CTGF基因特异性的3条siRNA oligo,通RT-PCR及Western blot检测其在瘢痕成纤维细胞中的干扰效果,从中筛选出一条最佳片段.根据所筛选出的最佳片段序列设计并构建CTGF-shRNA质粒,通过单酶切和测序鉴定该质粒.结果 3条siRNA oligo中C3序列干扰效果最佳.酶切鉴定和测序分析证实重组质粒构建成功.结论 成功构建CTGF-shRNA 质粒,为进一步探索CTGF对人皮肤病理性瘢痕形成的作用奠定了基础.
目的 構建結締組織生長因子 (connective tissue growth factor,CTGF) 短髮夾RNA (short hairpin RNA,shRNA) 重組質粒,研究其在人皮膚瘢痕成纖維細胞中對CTGF基因錶達的沉默效果,為探討病理性瘢痕的基因治療奠定基礎.方法 設計針對人CTGF基因特異性的3條siRNA oligo,通RT-PCR及Western blot檢測其在瘢痕成纖維細胞中的榦擾效果,從中篩選齣一條最佳片段.根據所篩選齣的最佳片段序列設計併構建CTGF-shRNA質粒,通過單酶切和測序鑒定該質粒.結果 3條siRNA oligo中C3序列榦擾效果最佳.酶切鑒定和測序分析證實重組質粒構建成功.結論 成功構建CTGF-shRNA 質粒,為進一步探索CTGF對人皮膚病理性瘢痕形成的作用奠定瞭基礎.
목적 구건결체조직생장인자 (connective tissue growth factor,CTGF) 단발협RNA (short hairpin RNA,shRNA) 중조질립,연구기재인피부반흔성섬유세포중대CTGF기인표체적침묵효과,위탐토병이성반흔적기인치료전정기출.방법 설계침대인CTGF기인특이성적3조siRNA oligo,통RT-PCR급Western blot검측기재반흔성섬유세포중적간우효과,종중사선출일조최가편단.근거소사선출적최가편단서렬설계병구건CTGF-shRNA질립,통과단매절화측서감정해질립.결과 3조siRNA oligo중C3서렬간우효과최가.매절감정화측서분석증실중조질립구건성공.결론 성공구건CTGF-shRNA 질립,위진일보탐색CTGF대인피부병이성반흔형성적작용전정료기출.
