徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2012年
11期
709-714
,共6页
孔德龙%孙伟%王东辉%刘瀛%汤仁仙%付琳琳%徐田云%刘宜升%郑葵阳
孔德龍%孫偉%王東輝%劉瀛%湯仁仙%付琳琳%徐田雲%劉宜升%鄭葵暘
공덕룡%손위%왕동휘%류영%탕인선%부림림%서전운%류의승%정규양
华支睾吸虫%单克隆抗体%ELISA
華支睪吸蟲%單剋隆抗體%ELISA
화지고흡충%단극륭항체%ELISA
目的 利用杂交瘤技术建立分泌抗华支睾吸虫成虫抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株并对其分泌抗体的免疫学活性进行初步鉴定.方法 以华支睾吸虫成虫抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,筛选分泌高滴度单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用动物体内诱生的方法制备单克隆抗体并对其纯化,测定所制备单抗效价和其免疫球蛋白亚类,检测单抗与猪囊尾蚴、弓形虫、疟原虫和日本血吸虫抗原的交叉反应,观测单抗对虫体的识别部位和其与感染小鼠肝脏组织中抗原的结合情况.结果 获得1株分泌高滴度抗华支睾吸虫成虫抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分泌的单抗命名为D10.其效价达1:200 000以上,纯度达90%以上,亚类鉴定为IgG1类;单抗株D10与猪囊尾蚴、弓形虫、疟原虫和日本血吸虫抗原无交叉反应;免疫荧光法见其与华支睾吸虫成虫表皮及虫卵结合;免疫组化显示单抗株D10与病变肝脏组织中汇管区及周围间质中的抗原结合明显.结论 制备的单抗株D10具有高效价和高特异性,为华支睾吸虫病的研究及华支睾吸虫病诊断抗体的研制奠定了基础.
目的 利用雜交瘤技術建立分泌抗華支睪吸蟲成蟲抗原的單剋隆抗體雜交瘤細胞株併對其分泌抗體的免疫學活性進行初步鑒定.方法 以華支睪吸蟲成蟲抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾細胞與Sp2/0骨髓瘤細胞進行融閤,篩選分泌高滴度單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,採用動物體內誘生的方法製備單剋隆抗體併對其純化,測定所製備單抗效價和其免疫毬蛋白亞類,檢測單抗與豬囊尾蚴、弓形蟲、瘧原蟲和日本血吸蟲抗原的交扠反應,觀測單抗對蟲體的識彆部位和其與感染小鼠肝髒組織中抗原的結閤情況.結果 穫得1株分泌高滴度抗華支睪吸蟲成蟲抗原的單剋隆抗體雜交瘤細胞株,分泌的單抗命名為D10.其效價達1:200 000以上,純度達90%以上,亞類鑒定為IgG1類;單抗株D10與豬囊尾蚴、弓形蟲、瘧原蟲和日本血吸蟲抗原無交扠反應;免疫熒光法見其與華支睪吸蟲成蟲錶皮及蟲卵結閤;免疫組化顯示單抗株D10與病變肝髒組織中彙管區及週圍間質中的抗原結閤明顯.結論 製備的單抗株D10具有高效價和高特異性,為華支睪吸蟲病的研究及華支睪吸蟲病診斷抗體的研製奠定瞭基礎.
목적 이용잡교류기술건립분비항화지고흡충성충항원적단극륭항체잡교류세포주병대기분비항체적면역학활성진행초보감정.방법 이화지고흡충성충항원면역BALB/c소서,취기비세포여Sp2/0골수류세포진행융합,사선분비고적도단극륭항체적잡교류세포주,채용동물체내유생적방법제비단극륭항체병대기순화,측정소제비단항효개화기면역구단백아류,검측단항여저낭미유、궁형충、학원충화일본혈흡충항원적교차반응,관측단항대충체적식별부위화기여감염소서간장조직중항원적결합정황.결과 획득1주분비고적도항화지고흡충성충항원적단극륭항체잡교류세포주,분비적단항명명위D10.기효개체1:200 000이상,순도체90%이상,아류감정위IgG1류;단항주D10여저낭미유、궁형충、학원충화일본혈흡충항원무교차반응;면역형광법견기여화지고흡충성충표피급충란결합;면역조화현시단항주D10여병변간장조직중회관구급주위간질중적항원결합명현.결론 제비적단항주D10구유고효개화고특이성,위화지고흡충병적연구급화지고흡충병진단항체적연제전정료기출.
