CAJ | 학술논문

目的探讨知母皂苷元(sarsasapogenin,Sar)对高糖引起的海马神经元损伤是否有保护作用.方法选用出生0~24 h Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取海马,进行海马神经元体外培养,培养7 d用于实验.实验分为正常对照组、高糖组、高糖+Sar(10、30、100 μmol·L-1)组;对照组:加入等量含0.1% DMSO培养基;高糖处理组:分别加入葡萄糖(30、50、100 mmol·L-1)作用48 h;高糖+Sar (10、30、100 μmol·L-1)组:先加入不同浓度Sar(10、30、100 μmol·L-1)作用1 h,然后加入葡萄糖(50 mmol·L-1)作用48 h;应用MTT方法观察细胞活力,免疫荧光和Western免疫印迹方法观察神经元突触素表达的改变.应用Hoechst 33258 核染色检测神经元凋亡.应用Western免疫印迹方法观察caspase-3和多聚ADP核糖聚合酶(PARP)蛋白表达改变.结果加入葡萄糖(30、50、100 mmol·L-1)作用48 h可使培养神经元细胞活力明显降低,神经元突触素蛋白表达明显降低.另外高糖也可引起神经元凋亡细胞百分比和活性caspase-3、PARP蛋白表达水平也较对照组明显提高.在加入高糖前加入不同浓度Sar (10、30、100 μmol·L-1)可明显对抗高糖引起的这些变化.培养海马神经元突触素蛋白表达较高糖组(50 mmol·L-1)明显增加,神经元凋亡细胞百分比和活性caspase-3、PARP蛋白表达水平也较高糖组明显降低.结论 Sar对高糖引起的海马神经元损伤具有明显的保护作用.
목적 탐토지모조감원(sarsasapogenin,Sar)대고당인기적해마신경원손상시부유보호작용.방법선용출생0~24 h Sprague-Dawley(SD)대서유서,취해마,진행해마신경원체외배양,배양7 d용우실험.실험분위정상대조조、고당조、고당+Sar(10、30、100 μmol·L-1)조;대조조:가입등량함0.1% DMSO배양기;고당처리조:분별가입포도당(30、50、100 mmol·L-1)작용48 h;고당+Sar (10、30、100 μmol·L-1)조:선가입불동농도Sar(10、30、100 μmol·L-1)작용1 h,연후가입포도당(50 mmol·L-1)작용48 h;응용MTT방법관찰세포활력,면역형광화Western면역인적방법관찰신경원돌촉소표체적개변.응용Hoechst 33258 핵염색검측신경원조망.응용Western면역인적방법관찰caspase-3화다취ADP핵당취합매(PARP)단백표체개변.결과가입포도당(30、50、100 mmol·L-1)작용48 h가사배양신경원세포활력명현강저,신경원돌촉소단백표체명현강저.령외고당야가인기신경원조망세포백분비화활성caspase-3、PARP단백표체수평야교대조조명현제고.재가입고당전가입불동농도Sar (10、30、100 μmol·L-1)가명현대항고당인기적저사변화.배양해마신경원돌촉소단백표체교고당조(50 mmol·L-1)명현증가,신경원조망세포백분비화활성caspase-3、PARP단백표체수평야교고당조명현강저.결론 Sar대고당인기적해마신경원손상구유명현적보호작용.