中国医药导报
中國醫藥導報
중국의약도보
CHINA MEDICAL HERALD
2012年
36期
18-21
,共4页
周高速%周冬翠%苏磊%贾英民%冯特%杨光辉%张健
週高速%週鼕翠%囌磊%賈英民%馮特%楊光輝%張健
주고속%주동취%소뢰%가영민%풍특%양광휘%장건
N-乙酰半胱氨酸%核因子κB%人肺微血管内皮细胞
N-乙酰半胱氨痠%覈因子κB%人肺微血管內皮細胞
N-을선반광안산%핵인자κB%인폐미혈관내피세포
目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对人肺微血管内皮细胞(HPMEC)核因子κB(NF-κB)结合活性和环氧合酶-2(COX-2)表达的影响机制.方法 体外培养HPMEC细胞株,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测NAC对HPMEC增殖活化的抑制作用,分别采用NAC(1 mmol/L)处理1 h,肿瘤坏死因子α(TNF-α)(100 ng/mL)处理1 h,NAC+TNF-α联合处理.凝胶电泳移动抑制实验检测HPMEC NF-κB的结合活性;免疫蛋白质印迹检测相应的HPMEC胞质内NF-κB抑制蛋白(IκB-α)的表达;免疫细胞化学观察HPMEC NF-κB表达的核内转移;激光共聚焦检测NAC对HPMEC中COX-2表达的影响.结果 NAC对HPMEC的增殖活化有明显抑制作用,NAC+TNF-α联合处理组吸光度值明显低于TNF-α处理组,差异均有统计学意义(均P < 0.05).TNF-α刺激后具有诱导HPMEC NF-κB结合活性,且IκB-α表达明显减弱,NAC处理组IκB-α表达高于TNF-α处理组,差异有高度统计学意义(P < 0.01).TNF-α处理1 h后,HPMEC NF-κB的主要表达从细胞质转移至细胞核内;NAC预处理后联合TNF-α刺激,HPMEC NF-κB表达主要位于细胞质,出现核内转移极少.HPMEC经TNF-α处理后细胞内COX-2表达明显高于NAC+TNF-α联合处理组以及正常对照组,差异均有统计学意义(均P < 0.05);而NAC+TNF-α联合处理组与正常对照组比较,差异无统计学意义(P > 0.05).结论 NAC 可抑制HPMEC增殖活化;NAC可抑制HPMEC NF-κB结合活性、减少核内转移发生和COX-2的表达.
目的 探討N-乙酰半胱氨痠(NAC)對人肺微血管內皮細胞(HPMEC)覈因子κB(NF-κB)結閤活性和環氧閤酶-2(COX-2)錶達的影響機製.方法 體外培養HPMEC細胞株,採用四甲基偶氮唑鹽(MTT)檢測NAC對HPMEC增殖活化的抑製作用,分彆採用NAC(1 mmol/L)處理1 h,腫瘤壞死因子α(TNF-α)(100 ng/mL)處理1 h,NAC+TNF-α聯閤處理.凝膠電泳移動抑製實驗檢測HPMEC NF-κB的結閤活性;免疫蛋白質印跡檢測相應的HPMEC胞質內NF-κB抑製蛋白(IκB-α)的錶達;免疫細胞化學觀察HPMEC NF-κB錶達的覈內轉移;激光共聚焦檢測NAC對HPMEC中COX-2錶達的影響.結果 NAC對HPMEC的增殖活化有明顯抑製作用,NAC+TNF-α聯閤處理組吸光度值明顯低于TNF-α處理組,差異均有統計學意義(均P < 0.05).TNF-α刺激後具有誘導HPMEC NF-κB結閤活性,且IκB-α錶達明顯減弱,NAC處理組IκB-α錶達高于TNF-α處理組,差異有高度統計學意義(P < 0.01).TNF-α處理1 h後,HPMEC NF-κB的主要錶達從細胞質轉移至細胞覈內;NAC預處理後聯閤TNF-α刺激,HPMEC NF-κB錶達主要位于細胞質,齣現覈內轉移極少.HPMEC經TNF-α處理後細胞內COX-2錶達明顯高于NAC+TNF-α聯閤處理組以及正常對照組,差異均有統計學意義(均P < 0.05);而NAC+TNF-α聯閤處理組與正常對照組比較,差異無統計學意義(P > 0.05).結論 NAC 可抑製HPMEC增殖活化;NAC可抑製HPMEC NF-κB結閤活性、減少覈內轉移髮生和COX-2的錶達.
목적 탐토N-을선반광안산(NAC)대인폐미혈관내피세포(HPMEC)핵인자κB(NF-κB)결합활성화배양합매-2(COX-2)표체적영향궤제.방법 체외배양HPMEC세포주,채용사갑기우담서염(MTT)검측NAC대HPMEC증식활화적억제작용,분별채용NAC(1 mmol/L)처리1 h,종류배사인자α(TNF-α)(100 ng/mL)처리1 h,NAC+TNF-α연합처리.응효전영이동억제실험검측HPMEC NF-κB적결합활성;면역단백질인적검측상응적HPMEC포질내NF-κB억제단백(IκB-α)적표체;면역세포화학관찰HPMEC NF-κB표체적핵내전이;격광공취초검측NAC대HPMEC중COX-2표체적영향.결과 NAC대HPMEC적증식활화유명현억제작용,NAC+TNF-α연합처리조흡광도치명현저우TNF-α처리조,차이균유통계학의의(균P < 0.05).TNF-α자격후구유유도HPMEC NF-κB결합활성,차IκB-α표체명현감약,NAC처리조IκB-α표체고우TNF-α처리조,차이유고도통계학의의(P < 0.01).TNF-α처리1 h후,HPMEC NF-κB적주요표체종세포질전이지세포핵내;NAC예처리후연합TNF-α자격,HPMEC NF-κB표체주요위우세포질,출현핵내전이겁소.HPMEC경TNF-α처리후세포내COX-2표체명현고우NAC+TNF-α연합처리조이급정상대조조,차이균유통계학의의(균P < 0.05);이NAC+TNF-α연합처리조여정상대조조비교,차이무통계학의의(P > 0.05).결론 NAC 가억제HPMEC증식활화;NAC가억제HPMEC NF-κB결합활성、감소핵내전이발생화COX-2적표체.
