中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
1期
48-52
,共5页
刘丹%彭易安%刘卓琦%汤蕾%尹东%何明
劉丹%彭易安%劉卓琦%湯蕾%尹東%何明
류단%팽역안%류탁기%탕뢰%윤동%하명
Bcl-2%Bad%线粒体%mPTP%质粒转染%脂多糖%心肌损伤
Bcl-2%Bad%線粒體%mPTP%質粒轉染%脂多糖%心肌損傷
Bcl-2%Bad%선립체%mPTP%질립전염%지다당%심기손상
目的 探讨Bcl-2/Bad/mPTP通路在14-3-3γ对抗脂多糖所致心肌损伤中的作用.方法 构建pFLAG-14-3-3γ重组质粒,转染至原代乳鼠心肌细胞中,然后行LPS损伤处理.处理结束后,取培养液检测LDH活性,MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,线粒体肿胀实验检测mPTP开放,Western blot检测14-3-3γ、Bad、phospho-Bad以及线粒体Bcl-2蛋白表达.结果 LPS损伤使心肌细胞LDH活性升高、细胞存活率下降、凋亡细胞增加、mPTP开放加剧,转染pFLAG-14-3-3γ重组质粒后再行LPS损伤,则LDH活性下降、细胞存活率升高、mPTP开放与细胞凋亡减少,同时phospho-Bad蛋白表达增加,线粒体Bcl-2蛋白表达增加.结论 pFLAG-14-3-3γ能够对抗脂多糖所致的心肌细胞损伤,其机制可能与磷酸化Bad,释放Bcl-2至线粒体,抑制mPTP的开放有关.
目的 探討Bcl-2/Bad/mPTP通路在14-3-3γ對抗脂多糖所緻心肌損傷中的作用.方法 構建pFLAG-14-3-3γ重組質粒,轉染至原代乳鼠心肌細胞中,然後行LPS損傷處理.處理結束後,取培養液檢測LDH活性,MTT比色法檢測細胞存活率,流式細胞術檢測細胞凋亡,線粒體腫脹實驗檢測mPTP開放,Western blot檢測14-3-3γ、Bad、phospho-Bad以及線粒體Bcl-2蛋白錶達.結果 LPS損傷使心肌細胞LDH活性升高、細胞存活率下降、凋亡細胞增加、mPTP開放加劇,轉染pFLAG-14-3-3γ重組質粒後再行LPS損傷,則LDH活性下降、細胞存活率升高、mPTP開放與細胞凋亡減少,同時phospho-Bad蛋白錶達增加,線粒體Bcl-2蛋白錶達增加.結論 pFLAG-14-3-3γ能夠對抗脂多糖所緻的心肌細胞損傷,其機製可能與燐痠化Bad,釋放Bcl-2至線粒體,抑製mPTP的開放有關.
목적 탐토Bcl-2/Bad/mPTP통로재14-3-3γ대항지다당소치심기손상중적작용.방법 구건pFLAG-14-3-3γ중조질립,전염지원대유서심기세포중,연후행LPS손상처리.처리결속후,취배양액검측LDH활성,MTT비색법검측세포존활솔,류식세포술검측세포조망,선립체종창실험검측mPTP개방,Western blot검측14-3-3γ、Bad、phospho-Bad이급선립체Bcl-2단백표체.결과 LPS손상사심기세포LDH활성승고、세포존활솔하강、조망세포증가、mPTP개방가극,전염pFLAG-14-3-3γ중조질립후재행LPS손상,칙LDH활성하강、세포존활솔승고、mPTP개방여세포조망감소,동시phospho-Bad단백표체증가,선립체Bcl-2단백표체증가.결론 pFLAG-14-3-3γ능구대항지다당소치적심기세포손상,기궤제가능여린산화Bad,석방Bcl-2지선립체,억제mPTP적개방유관.
