中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
1期
36-41
,共6页
齐元麟%张明芳%胡建石%徐剑文%林建银
齊元麟%張明芳%鬍建石%徐劍文%林建銀
제원린%장명방%호건석%서검문%림건은
蛇毒%去整合素%竹叶青素%原核表达%蛋白纯化%细胞运动
蛇毒%去整閤素%竹葉青素%原覈錶達%蛋白純化%細胞運動
사독%거정합소%죽협청소%원핵표체%단백순화%세포운동
目的 合成竹叶青素trigramin基因,在原核系统中表达、纯化,对其功能进行初步研究.方法 缓慢退火-PCR法合成竹叶青素基因并克隆入原核表达载体;IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白;常规柱层析和HPLC纯化天然竹叶青素;Born法测定竹叶青素对血小板聚集的抑制能力;CCK-8法测定竹叶青素对细胞增殖的影响;划痕实验分析竹叶青素对细胞运动的影响.结果合成了竹叶青素基因并在大肠杆菌中表达;获得纯度为89.1%的重组竹叶青素;重组竹叶青素抑制血小板聚集的IC50为0.78 μmol·L-1,而天然竹叶青素为0.35 μmol·L-1;竹叶青素不能抑制肿瘤细胞增殖,但可抑制细胞体外运动能力.结论 本研究成功合成竹叶青素基因并在大肠杆菌系统进行了有功能的表达和纯化,竹叶青素可抑制肿瘤细胞体外运动.
目的 閤成竹葉青素trigramin基因,在原覈繫統中錶達、純化,對其功能進行初步研究.方法 緩慢退火-PCR法閤成竹葉青素基因併剋隆入原覈錶達載體;IPTG誘導錶達;親和層析法純化重組蛋白;常規柱層析和HPLC純化天然竹葉青素;Born法測定竹葉青素對血小闆聚集的抑製能力;CCK-8法測定竹葉青素對細胞增殖的影響;劃痕實驗分析竹葉青素對細胞運動的影響.結果閤成瞭竹葉青素基因併在大腸桿菌中錶達;穫得純度為89.1%的重組竹葉青素;重組竹葉青素抑製血小闆聚集的IC50為0.78 μmol·L-1,而天然竹葉青素為0.35 μmol·L-1;竹葉青素不能抑製腫瘤細胞增殖,但可抑製細胞體外運動能力.結論 本研究成功閤成竹葉青素基因併在大腸桿菌繫統進行瞭有功能的錶達和純化,竹葉青素可抑製腫瘤細胞體外運動.
목적 합성죽협청소trigramin기인,재원핵계통중표체、순화,대기공능진행초보연구.방법 완만퇴화-PCR법합성죽협청소기인병극륭입원핵표체재체;IPTG유도표체;친화층석법순화중조단백;상규주층석화HPLC순화천연죽협청소;Born법측정죽협청소대혈소판취집적억제능력;CCK-8법측정죽협청소대세포증식적영향;화흔실험분석죽협청소대세포운동적영향.결과합성료죽협청소기인병재대장간균중표체;획득순도위89.1%적중조죽협청소;중조죽협청소억제혈소판취집적IC50위0.78 μmol·L-1,이천연죽협청소위0.35 μmol·L-1;죽협청소불능억제종류세포증식,단가억제세포체외운동능력.결론 본연구성공합성죽협청소기인병재대장간균계통진행료유공능적표체화순화,죽협청소가억제종류세포체외운동.
