实用医技杂志
實用醫技雜誌
실용의기잡지
JOURNAL OF PRACTICAL MEDICAL TECHNIQUES
2013年
1期
12-14
,共3页
牟琴峰%施媛萍%郑璐%魏江%罗光华
牟琴峰%施媛萍%鄭璐%魏江%囉光華
모금봉%시원평%정로%위강%라광화
基因表达调控,肿瘤%聚合酶链反应%反转录因子
基因錶達調控,腫瘤%聚閤酶鏈反應%反轉錄因子
기인표체조공,종류%취합매련반응%반전록인자
目的 建立检测人锌指蛋白23 (human zinc finger 23,ZNF23) 的实时荧光定量聚合酶链反应(PCR) 技术.方法 采用Primer Express Versions 3.0设计引物及TaqMan探针,检测ZNF23基因.将扩增的ZNF23基因片段纯化后与pMD19-T 载体连接,克隆构建含ZNF23基因片段的重组质粒,作为定量检测ZNF23基因表达的标准品.结果 PCR 扩增产物经测序分析证实为ZNF23特异性片段.本法灵敏度为650 copies/?滋L,线性范围为(6.50×102)~(6.50×107) copies/?滋L,相关系数R2为0.999,扩增效率E为97.28%,批间变异系数为0.78%～7.53%.结论 成功建立了检测人ZNF23的实时荧光定量PCR方法,且该方法特异性好、灵敏度高、通量高.
目的 建立檢測人鋅指蛋白23 (human zinc finger 23,ZNF23) 的實時熒光定量聚閤酶鏈反應(PCR) 技術.方法 採用Primer Express Versions 3.0設計引物及TaqMan探針,檢測ZNF23基因.將擴增的ZNF23基因片段純化後與pMD19-T 載體連接,剋隆構建含ZNF23基因片段的重組質粒,作為定量檢測ZNF23基因錶達的標準品.結果 PCR 擴增產物經測序分析證實為ZNF23特異性片段.本法靈敏度為650 copies/?滋L,線性範圍為(6.50×102)~(6.50×107) copies/?滋L,相關繫數R2為0.999,擴增效率E為97.28%,批間變異繫數為0.78%～7.53%.結論 成功建立瞭檢測人ZNF23的實時熒光定量PCR方法,且該方法特異性好、靈敏度高、通量高.
목적 건립검측인자지단백23 (human zinc finger 23,ZNF23) 적실시형광정량취합매련반응(PCR) 기술.방법 채용Primer Express Versions 3.0설계인물급TaqMan탐침,검측ZNF23기인.장확증적ZNF23기인편단순화후여pMD19-T 재체련접,극륭구건함ZNF23기인편단적중조질립,작위정량검측ZNF23기인표체적표준품.결과 PCR 확증산물경측서분석증실위ZNF23특이성편단.본법령민도위650 copies/?자L,선성범위위(6.50×102)~(6.50×107) copies/?자L,상관계수R2위0.999,확증효솔E위97.28%,비간변이계수위0.78%～7.53%.결론 성공건립료검측인ZNF23적실시형광정량PCR방법,차해방법특이성호、령민도고、통량고.
