中南医学科学杂志
中南醫學科學雜誌
중남의학과학잡지
JOURNAL OF UNIVERSITY OF SOUTH CHINA(MEDICAL EDITION)
2013年
1期
13-16
,共4页
殷杰%杨晓燕%虞佳%李倩%向琼%唐惠芳%雷小勇
慇傑%楊曉燕%虞佳%李倩%嚮瓊%唐惠芳%雷小勇
은걸%양효연%우가%리천%향경%당혜방%뢰소용
miRNA%miR-122%BEL-7402/5-FU%Bcl-XL%Bcl-2%耐药
miRNA%miR-122%BEL-7402/5-FU%Bcl-XL%Bcl-2%耐藥
miRNA%miR-122%BEL-7402/5-FU%Bcl-XL%Bcl-2%내약
目的 构建miR-122真核表达载体并检测其表达对BEL-7402/5-FU细胞中耐药相关基因Bcl-xL,Bcl-2基因表型的作用.方法 人工合成miR-122成熟cDNA序列,以质粒载体pSilencer 3.1-H1 neo为母本,构建miR-122真核表达载体,空载体作为对照,利用脂质体2000和G418筛选稳转至BEL-7402/5-FU细胞中.其中转染miR-122载体的细胞为miR-122转染组,转染空载体的细胞为空载体转染组,通过实时荧光定量RT-PCR检测未转染组、转染空载体组和miR-122转染组细胞中miR-122表达水平.验证miR-122载体是否在细胞中稳定表达.并通过实时荧光定量RT-PCR检测未转染组、空载体转染组和miR-122转染组中耐药相关基因Bcl-xL,Bcl-2的基因表达情况.结果 miR-122真核表达载体在BEL-7402/5-FU细胞中稳定表达,与未转染组和空载体转染组比较,miR-122转染组中Bcl-xL,Bcl-2的基因表达水平显著降低.结论 miR-122可下调耐药相关基因Bcl-xL,Bcl-2的基因表达,MiR-122是降低BEL-7402/5-FU细胞的5-氟尿嘧啶药物敏感性影响的潜在因素.
目的 構建miR-122真覈錶達載體併檢測其錶達對BEL-7402/5-FU細胞中耐藥相關基因Bcl-xL,Bcl-2基因錶型的作用.方法 人工閤成miR-122成熟cDNA序列,以質粒載體pSilencer 3.1-H1 neo為母本,構建miR-122真覈錶達載體,空載體作為對照,利用脂質體2000和G418篩選穩轉至BEL-7402/5-FU細胞中.其中轉染miR-122載體的細胞為miR-122轉染組,轉染空載體的細胞為空載體轉染組,通過實時熒光定量RT-PCR檢測未轉染組、轉染空載體組和miR-122轉染組細胞中miR-122錶達水平.驗證miR-122載體是否在細胞中穩定錶達.併通過實時熒光定量RT-PCR檢測未轉染組、空載體轉染組和miR-122轉染組中耐藥相關基因Bcl-xL,Bcl-2的基因錶達情況.結果 miR-122真覈錶達載體在BEL-7402/5-FU細胞中穩定錶達,與未轉染組和空載體轉染組比較,miR-122轉染組中Bcl-xL,Bcl-2的基因錶達水平顯著降低.結論 miR-122可下調耐藥相關基因Bcl-xL,Bcl-2的基因錶達,MiR-122是降低BEL-7402/5-FU細胞的5-氟尿嘧啶藥物敏感性影響的潛在因素.
목적 구건miR-122진핵표체재체병검측기표체대BEL-7402/5-FU세포중내약상관기인Bcl-xL,Bcl-2기인표형적작용.방법 인공합성miR-122성숙cDNA서렬,이질립재체pSilencer 3.1-H1 neo위모본,구건miR-122진핵표체재체,공재체작위대조,이용지질체2000화G418사선은전지BEL-7402/5-FU세포중.기중전염miR-122재체적세포위miR-122전염조,전염공재체적세포위공재체전염조,통과실시형광정량RT-PCR검측미전염조、전염공재체조화miR-122전염조세포중miR-122표체수평.험증miR-122재체시부재세포중은정표체.병통과실시형광정량RT-PCR검측미전염조、공재체전염조화miR-122전염조중내약상관기인Bcl-xL,Bcl-2적기인표체정황.결과 miR-122진핵표체재체재BEL-7402/5-FU세포중은정표체,여미전염조화공재체전염조비교,miR-122전염조중Bcl-xL,Bcl-2적기인표체수평현저강저.결론 miR-122가하조내약상관기인Bcl-xL,Bcl-2적기인표체,MiR-122시강저BEL-7402/5-FU세포적5-불뇨밀정약물민감성영향적잠재인소.
