重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2013年
1期
1-5
,共5页
陈忠蛟%李鹏%杨明珍%陈安%胡川闽
陳忠蛟%李鵬%楊明珍%陳安%鬍川閩
진충교%리붕%양명진%진안%호천민
转染%RNA干扰%慢病毒感染%细胞骨架%基因,IBP
轉染%RNA榦擾%慢病毒感染%細胞骨架%基因,IBP
전염%RNA간우%만병독감염%세포골가%기인,IBP
目的 研究干扰素调节因子4结合蛋白(IBP)的表达抑制对人乳腺癌MDA-MB-231细胞中微丝、微管的影响.方法 设计并合成针对人IBP mRNA的RNA干扰(RNAi)序列,构建RNAi慢病毒表达载体,与包装质粒共转染人胚肾293FT细胞获得病毒颗粒,以病毒感染MDA-MB-231细胞.采用免疫印迹及实时聚合酶链反应(RT-PCR)确定能有效抑制IBP的RNAi序列,筛选出获得稳定感染的细胞株并进行微丝、微管染色.结果 成功构建了IBP特异性的RNAi慢病毒表达载体和对照载体,对MDA-MB-231细胞IBP的沉默效率为69.9%;通过微丝、微管染色证实IBP表达下调后,细胞形态出现明显变化,细胞体增大,丝状伪足减少,片状伪足增多,微管排列紊乱.结论 IBP蛋白通过影响微管、微丝的排列而改变MDA-MB-231细胞生物学行为.
目的 研究榦擾素調節因子4結閤蛋白(IBP)的錶達抑製對人乳腺癌MDA-MB-231細胞中微絲、微管的影響.方法 設計併閤成針對人IBP mRNA的RNA榦擾(RNAi)序列,構建RNAi慢病毒錶達載體,與包裝質粒共轉染人胚腎293FT細胞穫得病毒顆粒,以病毒感染MDA-MB-231細胞.採用免疫印跡及實時聚閤酶鏈反應(RT-PCR)確定能有效抑製IBP的RNAi序列,篩選齣穫得穩定感染的細胞株併進行微絲、微管染色.結果 成功構建瞭IBP特異性的RNAi慢病毒錶達載體和對照載體,對MDA-MB-231細胞IBP的沉默效率為69.9%;通過微絲、微管染色證實IBP錶達下調後,細胞形態齣現明顯變化,細胞體增大,絲狀偽足減少,片狀偽足增多,微管排列紊亂.結論 IBP蛋白通過影響微管、微絲的排列而改變MDA-MB-231細胞生物學行為.
목적 연구간우소조절인자4결합단백(IBP)적표체억제대인유선암MDA-MB-231세포중미사、미관적영향.방법 설계병합성침대인IBP mRNA적RNA간우(RNAi)서렬,구건RNAi만병독표체재체,여포장질립공전염인배신293FT세포획득병독과립,이병독감염MDA-MB-231세포.채용면역인적급실시취합매련반응(RT-PCR)학정능유효억제IBP적RNAi서렬,사선출획득은정감염적세포주병진행미사、미관염색.결과 성공구건료IBP특이성적RNAi만병독표체재체화대조재체,대MDA-MB-231세포IBP적침묵효솔위69.9%;통과미사、미관염색증실IBP표체하조후,세포형태출현명현변화,세포체증대,사상위족감소,편상위족증다,미관배렬문란.결론 IBP단백통과영향미관、미사적배렬이개변MDA-MB-231세포생물학행위.
