解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2012年
6期
778-783
,共6页
陈秋萍%黄赛赛%周伟伟%沈施仁%曹苏
陳鞦萍%黃賽賽%週偉偉%瀋施仁%曹囌
진추평%황새새%주위위%침시인%조소
线粒体ATP敏感性钾通道%心肌微血管内皮细胞%PI3K%Akt%Fractalkine%缺氧%复氧%反转录-聚合酶链反应%免疫印迹法%大鼠
線粒體ATP敏感性鉀通道%心肌微血管內皮細胞%PI3K%Akt%Fractalkine%缺氧%複氧%反轉錄-聚閤酶鏈反應%免疫印跡法%大鼠
선립체ATP민감성갑통도%심기미혈관내피세포%PI3K%Akt%Fractalkine%결양%복양%반전록-취합매련반응%면역인적법%대서
目的 观察PI3 K/Akt信号在线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)开放抑制缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs) fractalkine(FKN)表达中的作用.方法 培养SD大鼠离体MMECs,建立缺氧复氧损伤模型24皿,随机分为4组(n=6):正常对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(DZ组)、LY294002+二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(LY294002+DZ组).DZ组加入100μmol/L二氮嗪预处理2h,LY294002+ DZ组在加入100 μmol/L LY294002预处理2h后再加入100μmol/L二氮嗪预处理2h,然后和缺氧复氧组同样进行缺氧2h、复氧2h.Hoeehst染色观察凋亡细胞显微结构,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活力,RT-PCR检测Akt和FKNmRNA水平,Western blotting检测Akt蛋白水平.结果 与N组比较,H/R组细胞增殖率显著降低(P＜0.01)、凋亡率显著升高(P＜0.01),FKN mRNA和FKN蛋白表达显著增加(P＜0.01)、Akt mRNA和Akt蛋白升高(P＜0.05).与H/R组比较,DZ组细胞增殖率显著升高(P＜0.01)、凋亡率显著降低(P＜0.01),AktmRNA和蛋白显著升高(P＜0.01和P＜0.05),FKN mRNA和蛋白表达显著降低(P＜0.01).与DZ组比较,LY294002+ DZ组Akt mRNA和蛋白显著降低(P＜0.01)、FKN mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.01).结论 mito-KATP开放通过PI3K/Akt信号调节下游FKN mRNA的转录及表达,促使细胞增殖,抑制细胞凋亡,实现对缺氧复氧MMECs损伤的保护.
目的 觀察PI3 K/Akt信號在線粒體ATP敏感性鉀通道(mito-KATP)開放抑製缺氧複氧大鼠心肌微血管內皮細胞(MMECs) fractalkine(FKN)錶達中的作用.方法 培養SD大鼠離體MMECs,建立缺氧複氧損傷模型24皿,隨機分為4組(n=6):正常對照組(N組)、缺氧/複氧組(H/R組)、二氮嗪預處理+缺氧/複氧組(DZ組)、LY294002+二氮嗪預處理+缺氧/複氧組(LY294002+DZ組).DZ組加入100μmol/L二氮嗪預處理2h,LY294002+ DZ組在加入100 μmol/L LY294002預處理2h後再加入100μmol/L二氮嗪預處理2h,然後和缺氧複氧組同樣進行缺氧2h、複氧2h.Hoeehst染色觀察凋亡細胞顯微結構,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測定細胞活力,RT-PCR檢測Akt和FKNmRNA水平,Western blotting檢測Akt蛋白水平.結果 與N組比較,H/R組細胞增殖率顯著降低(P＜0.01)、凋亡率顯著升高(P＜0.01),FKN mRNA和FKN蛋白錶達顯著增加(P＜0.01)、Akt mRNA和Akt蛋白升高(P＜0.05).與H/R組比較,DZ組細胞增殖率顯著升高(P＜0.01)、凋亡率顯著降低(P＜0.01),AktmRNA和蛋白顯著升高(P＜0.01和P＜0.05),FKN mRNA和蛋白錶達顯著降低(P＜0.01).與DZ組比較,LY294002+ DZ組Akt mRNA和蛋白顯著降低(P＜0.01)、FKN mRNA和蛋白錶達顯著升高(P＜0.01).結論 mito-KATP開放通過PI3K/Akt信號調節下遊FKN mRNA的轉錄及錶達,促使細胞增殖,抑製細胞凋亡,實現對缺氧複氧MMECs損傷的保護.
목적 관찰PI3 K/Akt신호재선립체ATP민감성갑통도(mito-KATP)개방억제결양복양대서심기미혈관내피세포(MMECs) fractalkine(FKN)표체중적작용.방법 배양SD대서리체MMECs,건립결양복양손상모형24명,수궤분위4조(n=6):정상대조조(N조)、결양/복양조(H/R조)、이담진예처리+결양/복양조(DZ조)、LY294002+이담진예처리+결양/복양조(LY294002+DZ조).DZ조가입100μmol/L이담진예처리2h,LY294002+ DZ조재가입100 μmol/L LY294002예처리2h후재가입100μmol/L이담진예처리2h,연후화결양복양조동양진행결양2h、복양2h.Hoeehst염색관찰조망세포현미결구,사갑기우담서염(MTT)법측정세포활력,RT-PCR검측Akt화FKNmRNA수평,Western blotting검측Akt단백수평.결과 여N조비교,H/R조세포증식솔현저강저(P＜0.01)、조망솔현저승고(P＜0.01),FKN mRNA화FKN단백표체현저증가(P＜0.01)、Akt mRNA화Akt단백승고(P＜0.05).여H/R조비교,DZ조세포증식솔현저승고(P＜0.01)、조망솔현저강저(P＜0.01),AktmRNA화단백현저승고(P＜0.01화P＜0.05),FKN mRNA화단백표체현저강저(P＜0.01).여DZ조비교,LY294002+ DZ조Akt mRNA화단백현저강저(P＜0.01)、FKN mRNA화단백표체현저승고(P＜0.01).결론 mito-KATP개방통과PI3K/Akt신호조절하유FKN mRNA적전록급표체,촉사세포증식,억제세포조망,실현대결양복양MMECs손상적보호.
