解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2012年
6期
772-777
,共6页
李建明%曾杰%罗学港%雷德亮
李建明%曾傑%囉學港%雷德亮
리건명%증걸%라학항%뢰덕량
17cα雌二醇%神经母细胞瘤细胞株%β-淀粉样前体蛋白/早老因子-1%β-淀粉样蛋白%免疫印迹法%二氢乙啶染色
17cα雌二醇%神經母細胞瘤細胞株%β-澱粉樣前體蛋白/早老因子-1%β-澱粉樣蛋白%免疫印跡法%二氫乙啶染色
17cα자이순%신경모세포류세포주%β-정분양전체단백/조로인자-1%β-정분양단백%면역인적법%이경을정염색
目的 探讨17α雌二醇(E2α)对稳定表达人β-淀粉样前体蛋白(APP)/早老因子-1(PS1)即APP/PS1基因的神经母细胞瘤细胞株(Neuro-2a)(APP/PS1 N2a)β-淀粉样蛋白(Aβ)产生的影响及可能机制.方法 将APP/PS1 N2a细胞用10×10-9mol/L E2α预处理2d,更换培养液后,分别进行如下处理:1.加入不同浓度E2d(25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)和溶媒(对照组),用免疫印迹法(Western blotting)检测APP/PS1 N2a 细胞内和细胞外的Aβ蛋白水平及细胞BACE1蛋白水平;2.加入100nmol/L E2α、20nmol/L葡萄糖和5mIU葡萄糖氧化酶(GOX).24h后,进行二氢乙啶(DHE)染色观察APP/PS1 N2a细胞中活性氧(ROS)含量的变化.结果 不同浓度E2α(25 nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)处理后,细胞外Aβ蛋白水平明显减少,差异具有统计学意义(P＜0.05);而细胞内Aβ蛋白水平无明显变化(P＞0.05);细胞β-分泌酶-1(BACE1)的表达水平无明显变化(P＞0.05);E2α可以减少G/GOX所致APP/PS1 N2a细胞ROS的产生.结论 E2α可以减少细胞外Aβ的产生,其机制可能与抗氧化损伤有关.
目的 探討17α雌二醇(E2α)對穩定錶達人β-澱粉樣前體蛋白(APP)/早老因子-1(PS1)即APP/PS1基因的神經母細胞瘤細胞株(Neuro-2a)(APP/PS1 N2a)β-澱粉樣蛋白(Aβ)產生的影響及可能機製.方法 將APP/PS1 N2a細胞用10×10-9mol/L E2α預處理2d,更換培養液後,分彆進行如下處理:1.加入不同濃度E2d(25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)和溶媒(對照組),用免疫印跡法(Western blotting)檢測APP/PS1 N2a 細胞內和細胞外的Aβ蛋白水平及細胞BACE1蛋白水平;2.加入100nmol/L E2α、20nmol/L葡萄糖和5mIU葡萄糖氧化酶(GOX).24h後,進行二氫乙啶(DHE)染色觀察APP/PS1 N2a細胞中活性氧(ROS)含量的變化.結果 不同濃度E2α(25 nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)處理後,細胞外Aβ蛋白水平明顯減少,差異具有統計學意義(P＜0.05);而細胞內Aβ蛋白水平無明顯變化(P＞0.05);細胞β-分泌酶-1(BACE1)的錶達水平無明顯變化(P＞0.05);E2α可以減少G/GOX所緻APP/PS1 N2a細胞ROS的產生.結論 E2α可以減少細胞外Aβ的產生,其機製可能與抗氧化損傷有關.
목적 탐토17α자이순(E2α)대은정표체인β-정분양전체단백(APP)/조로인자-1(PS1)즉APP/PS1기인적신경모세포류세포주(Neuro-2a)(APP/PS1 N2a)β-정분양단백(Aβ)산생적영향급가능궤제.방법 장APP/PS1 N2a세포용10×10-9mol/L E2α예처리2d,경환배양액후,분별진행여하처리:1.가입불동농도E2d(25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)화용매(대조조),용면역인적법(Western blotting)검측APP/PS1 N2a 세포내화세포외적Aβ단백수평급세포BACE1단백수평;2.가입100nmol/L E2α、20nmol/L포도당화5mIU포도당양화매(GOX).24h후,진행이경을정(DHE)염색관찰APP/PS1 N2a세포중활성양(ROS)함량적변화.결과 불동농도E2α(25 nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L)처리후,세포외Aβ단백수평명현감소,차이구유통계학의의(P＜0.05);이세포내Aβ단백수평무명현변화(P＞0.05);세포β-분비매-1(BACE1)적표체수평무명현변화(P＞0.05);E2α가이감소G/GOX소치APP/PS1 N2a세포ROS적산생.결론 E2α가이감소세포외Aβ적산생,기궤제가능여항양화손상유관.
