解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2012年
6期
726-729
,共4页
王凤超%葛鑫%张伦军%郭晖%朱安友%吕合作%胡建国
王鳳超%葛鑫%張倫軍%郭暉%硃安友%呂閤作%鬍建國
왕봉초%갈흠%장륜군%곽휘%주안우%려합작%호건국
少突胶质细胞转录因子2%少突胶质前体细胞%少突胶质细胞%慢病毒表达载体%转染%聚合酶链反应%大鼠
少突膠質細胞轉錄因子2%少突膠質前體細胞%少突膠質細胞%慢病毒錶達載體%轉染%聚閤酶鏈反應%大鼠
소돌효질세포전록인자2%소돌효질전체세포%소돌효질세포%만병독표체재체%전염%취합매련반응%대서
目的 构建大鼠少突胶质细胞转录因子2(Olig2)的慢病毒表达载体,并转染少突胶质前体细胞(OPCs),观察Olig2过表达对OPCs向少突胶质细胞(OLs)分化的影响.方法 设计合成PCR引物,从大鼠pEGFP-N3-Olig2表达质粒中扩增并克隆大鼠Olig2-EGFP片段,将其插入到pLenti6.3慢病毒表达载体中,形成pLenti6.3-Olig2-EGFP慢病毒表达载体.将其与包装质粒混合后共转染293T细胞,包装产生慢病毒后感染培养的OPCs,观察Olig2在感染细胞中的表达并鉴定其表达对OPCs向OLs分化的影响.结果 成功将大鼠Olig2-EGFP片段克隆入pLenti6.3慢病毒表达载体,构建的pLenti6.3-Olig2-EGFP慢病毒表达载体能够高效表达.与空质粒转染的OPCs相比,重组质粒转染的OPCs体外诱导分化后产生更多的OLs (n =5,P＜0.01).结论 成功建立大鼠pLenti6.3-Olig2-EGFP慢病毒表达系统,慢病毒介导的Olig2过表达促进大鼠OPCs向OLs分化.
目的 構建大鼠少突膠質細胞轉錄因子2(Olig2)的慢病毒錶達載體,併轉染少突膠質前體細胞(OPCs),觀察Olig2過錶達對OPCs嚮少突膠質細胞(OLs)分化的影響.方法 設計閤成PCR引物,從大鼠pEGFP-N3-Olig2錶達質粒中擴增併剋隆大鼠Olig2-EGFP片段,將其插入到pLenti6.3慢病毒錶達載體中,形成pLenti6.3-Olig2-EGFP慢病毒錶達載體.將其與包裝質粒混閤後共轉染293T細胞,包裝產生慢病毒後感染培養的OPCs,觀察Olig2在感染細胞中的錶達併鑒定其錶達對OPCs嚮OLs分化的影響.結果 成功將大鼠Olig2-EGFP片段剋隆入pLenti6.3慢病毒錶達載體,構建的pLenti6.3-Olig2-EGFP慢病毒錶達載體能夠高效錶達.與空質粒轉染的OPCs相比,重組質粒轉染的OPCs體外誘導分化後產生更多的OLs (n =5,P＜0.01).結論 成功建立大鼠pLenti6.3-Olig2-EGFP慢病毒錶達繫統,慢病毒介導的Olig2過錶達促進大鼠OPCs嚮OLs分化.
목적 구건대서소돌효질세포전록인자2(Olig2)적만병독표체재체,병전염소돌효질전체세포(OPCs),관찰Olig2과표체대OPCs향소돌효질세포(OLs)분화적영향.방법 설계합성PCR인물,종대서pEGFP-N3-Olig2표체질립중확증병극륭대서Olig2-EGFP편단,장기삽입도pLenti6.3만병독표체재체중,형성pLenti6.3-Olig2-EGFP만병독표체재체.장기여포장질립혼합후공전염293T세포,포장산생만병독후감염배양적OPCs,관찰Olig2재감염세포중적표체병감정기표체대OPCs향OLs분화적영향.결과 성공장대서Olig2-EGFP편단극륭입pLenti6.3만병독표체재체,구건적pLenti6.3-Olig2-EGFP만병독표체재체능구고효표체.여공질립전염적OPCs상비,중조질립전염적OPCs체외유도분화후산생경다적OLs (n =5,P＜0.01).결론 성공건립대서pLenti6.3-Olig2-EGFP만병독표체계통,만병독개도적Olig2과표체촉진대서OPCs향OLs분화.
