中国医药工业杂志
中國醫藥工業雜誌
중국의약공업잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACEUTICALS
2013年
1期
21-26
,共6页
梁文%胡又佳%朱宝泉%谢丽萍
樑文%鬍又佳%硃寶泉%謝麗萍
량문%호우가%주보천%사려평
菌丝霉素%高效表达%分离%纯化%抑菌活性%临床耐药菌
菌絲黴素%高效錶達%分離%純化%抑菌活性%臨床耐藥菌
균사매소%고효표체%분리%순화%억균활성%림상내약균
将来自腐生子囊菌中的菌丝霉素成熟肽基因经大肠杆菌密码子优化后,克隆到pET32a(+)载体中,构建了含His-tag标签和TEV酶识别位点的菌丝霉素表达质粒pYG330,使含菌丝霉素的融合蛋白在大肠杆菌中以可溶形式高效表达.建立了菌丝霉素的纯化路线,将融合蛋白进行TEV酶切后脱盐再进行亲和色谱分离,收集目的蛋白冻干浓缩,通过高效液相色谱进一步纯化获得纯度72％的目的多肽.纯化所得菌丝霉素对临床耐药金黄色葡萄球菌M-2和枯草芽孢杆菌有明显的抑菌活性.
將來自腐生子囊菌中的菌絲黴素成熟肽基因經大腸桿菌密碼子優化後,剋隆到pET32a(+)載體中,構建瞭含His-tag標籤和TEV酶識彆位點的菌絲黴素錶達質粒pYG330,使含菌絲黴素的融閤蛋白在大腸桿菌中以可溶形式高效錶達.建立瞭菌絲黴素的純化路線,將融閤蛋白進行TEV酶切後脫鹽再進行親和色譜分離,收集目的蛋白凍榦濃縮,通過高效液相色譜進一步純化穫得純度72％的目的多肽.純化所得菌絲黴素對臨床耐藥金黃色葡萄毬菌M-2和枯草芽孢桿菌有明顯的抑菌活性.
장래자부생자낭균중적균사매소성숙태기인경대장간균밀마자우화후,극륭도pET32a(+)재체중,구건료함His-tag표첨화TEV매식별위점적균사매소표체질립pYG330,사함균사매소적융합단백재대장간균중이가용형식고효표체.건립료균사매소적순화로선,장융합단백진행TEV매절후탈염재진행친화색보분리,수집목적단백동간농축,통과고효액상색보진일보순화획득순도72％적목적다태.순화소득균사매소대림상내약금황색포도구균M-2화고초아포간균유명현적억균활성.
