内蒙古医学杂志
內矇古醫學雜誌
내몽고의학잡지
INNER MONGOLIA MEDICAL JOURNAL
2012年
10期
1169-1173
,共5页
早产儿视网膜病变%内皮生长因子%基因表达
早產兒視網膜病變%內皮生長因子%基因錶達
조산인시망막병변%내피생장인자%기인표체
目的:探讨高氧诱导视网膜病变(OIR)动物模型的建立及动物模型血管内皮生长因子(VEGF)基因的调节变化规律,阐明VEGFmRNA在早产儿视网膜病变模型中的表达及其意义.方法:①将10只7日龄C57BL/6J幼鼠暴露在(75±2)％浓度的高氧状态下5d,随后在正常氧环境下5d,作为氧诱导模型组；采用同日龄幼鼠10只作为正常对照组,空气中饲养.分别在出生后第17d处死幼鼠.视网膜切片HE染色,观察并计数细胞核数目.②将24只7日龄幼鼠作为实验组,分为3个小组.采用同日龄的幼鼠24只作为正常对照组,同样的方法饲养,分别在出生后第12、14、17d处死幼鼠,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察各组VEGFmRNA的变化.结果:①视网膜切片苏木精-伊红(HE)染色法行血管内皮细胞核计数,可见正常组仅在少数切片中见到突破内界膜的血管内皮细胞核,平均每张切片数(0.390±0.099)个；高氧组可见到较多的新生血管芽及突破内界膜的血管内皮细胞核,每张切片突破内界膜的血管内皮细胞核个数平均为(33.590±1,462),差异有统计学意义(P＜0.05).②RT-PCR结果显示,吸氧组新生小鼠第12 d OIR模型组视网膜表达VEGmRNA水平(0.295±0.038)较正常组(0.344±0.047)下降,P＜ 0.05;第14 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA水平(0.762±0.063)较正常组(0.335±0.032)增高,P＜0.05；第17 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA水平(0.678±0.046)较正常组(0.318±0.044)增高,P＜0.05.③第14 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA水平较第12d明显升高,P＜0.05；第17 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA较第14 d下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).第17 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA较第12d升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).④正常组第12 d、第14 d、第17 d视网膜表达VEGFmRNA水平逐渐下降,经检验差异无统计学意义.结论:①新生C57BL/6J小鼠动物模型制作周期比较短,成功率比较高,是研究视网膜病变的较合适模型.②苏木精-伊红染色可明显显示视网膜突破内界膜的血管内皮细胞核数,且造模组和对照组间差异有统计学意义(P＜0.05).③不同时间点,OIR模型组与正常组以及各OIR模型组之间,VEGFrnRNA的表达均有显著性差异(P＜0.05),高氧环境抑制VEGFmRNA的表达,而高氧后的相对低氧可促进VEGFmRNA的表达.④推断在小鼠出高氧箱当天这个时间点,给予抗VEGF治疗,有可能在一定程度上减少早产儿视网膜病变的发生.
目的:探討高氧誘導視網膜病變(OIR)動物模型的建立及動物模型血管內皮生長因子(VEGF)基因的調節變化規律,闡明VEGFmRNA在早產兒視網膜病變模型中的錶達及其意義.方法:①將10隻7日齡C57BL/6J幼鼠暴露在(75±2)％濃度的高氧狀態下5d,隨後在正常氧環境下5d,作為氧誘導模型組；採用同日齡幼鼠10隻作為正常對照組,空氣中飼養.分彆在齣生後第17d處死幼鼠.視網膜切片HE染色,觀察併計數細胞覈數目.②將24隻7日齡幼鼠作為實驗組,分為3箇小組.採用同日齡的幼鼠24隻作為正常對照組,同樣的方法飼養,分彆在齣生後第12、14、17d處死幼鼠,採用半定量逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)觀察各組VEGFmRNA的變化.結果:①視網膜切片囌木精-伊紅(HE)染色法行血管內皮細胞覈計數,可見正常組僅在少數切片中見到突破內界膜的血管內皮細胞覈,平均每張切片數(0.390±0.099)箇；高氧組可見到較多的新生血管芽及突破內界膜的血管內皮細胞覈,每張切片突破內界膜的血管內皮細胞覈箇數平均為(33.590±1,462),差異有統計學意義(P＜0.05).②RT-PCR結果顯示,吸氧組新生小鼠第12 d OIR模型組視網膜錶達VEGmRNA水平(0.295±0.038)較正常組(0.344±0.047)下降,P＜ 0.05;第14 d OIR模型組視網膜錶達VEGFmRNA水平(0.762±0.063)較正常組(0.335±0.032)增高,P＜0.05；第17 d OIR模型組視網膜錶達VEGFmRNA水平(0.678±0.046)較正常組(0.318±0.044)增高,P＜0.05.③第14 d OIR模型組視網膜錶達VEGFmRNA水平較第12d明顯升高,P＜0.05；第17 d OIR模型組視網膜錶達VEGFmRNA較第14 d下降,差異均有統計學意義(P＜0.05).第17 d OIR模型組視網膜錶達VEGFmRNA較第12d升高,差異均有統計學意義(P＜0.05).④正常組第12 d、第14 d、第17 d視網膜錶達VEGFmRNA水平逐漸下降,經檢驗差異無統計學意義.結論:①新生C57BL/6J小鼠動物模型製作週期比較短,成功率比較高,是研究視網膜病變的較閤適模型.②囌木精-伊紅染色可明顯顯示視網膜突破內界膜的血管內皮細胞覈數,且造模組和對照組間差異有統計學意義(P＜0.05).③不同時間點,OIR模型組與正常組以及各OIR模型組之間,VEGFrnRNA的錶達均有顯著性差異(P＜0.05),高氧環境抑製VEGFmRNA的錶達,而高氧後的相對低氧可促進VEGFmRNA的錶達.④推斷在小鼠齣高氧箱噹天這箇時間點,給予抗VEGF治療,有可能在一定程度上減少早產兒視網膜病變的髮生.
목적:탐토고양유도시망막병변(OIR)동물모형적건립급동물모형혈관내피생장인자(VEGF)기인적조절변화규률,천명VEGFmRNA재조산인시망막병변모형중적표체급기의의.방법:①장10지7일령C57BL/6J유서폭로재(75±2)％농도적고양상태하5d,수후재정상양배경하5d,작위양유도모형조；채용동일령유서10지작위정상대조조,공기중사양.분별재출생후제17d처사유서.시망막절편HE염색,관찰병계수세포핵수목.②장24지7일령유서작위실험조,분위3개소조.채용동일령적유서24지작위정상대조조,동양적방법사양,분별재출생후제12、14、17d처사유서,채용반정량역전록-취합매련반응(RT-PCR)관찰각조VEGFmRNA적변화.결과:①시망막절편소목정-이홍(HE)염색법행혈관내피세포핵계수,가견정상조부재소수절편중견도돌파내계막적혈관내피세포핵,평균매장절편수(0.390±0.099)개；고양조가견도교다적신생혈관아급돌파내계막적혈관내피세포핵,매장절편돌파내계막적혈관내피세포핵개수평균위(33.590±1,462),차이유통계학의의(P＜0.05).②RT-PCR결과현시,흡양조신생소서제12 d OIR모형조시망막표체VEGmRNA수평(0.295±0.038)교정상조(0.344±0.047)하강,P＜ 0.05;제14 d OIR모형조시망막표체VEGFmRNA수평(0.762±0.063)교정상조(0.335±0.032)증고,P＜0.05；제17 d OIR모형조시망막표체VEGFmRNA수평(0.678±0.046)교정상조(0.318±0.044)증고,P＜0.05.③제14 d OIR모형조시망막표체VEGFmRNA수평교제12d명현승고,P＜0.05；제17 d OIR모형조시망막표체VEGFmRNA교제14 d하강,차이균유통계학의의(P＜0.05).제17 d OIR모형조시망막표체VEGFmRNA교제12d승고,차이균유통계학의의(P＜0.05).④정상조제12 d、제14 d、제17 d시망막표체VEGFmRNA수평축점하강,경검험차이무통계학의의.결론:①신생C57BL/6J소서동물모형제작주기비교단,성공솔비교고,시연구시망막병변적교합괄모형.②소목정-이홍염색가명현현시시망막돌파내계막적혈관내피세포핵수,차조모조화대조조간차이유통계학의의(P＜0.05).③불동시간점,OIR모형조여정상조이급각OIR모형조지간,VEGFrnRNA적표체균유현저성차이(P＜0.05),고양배경억제VEGFmRNA적표체,이고양후적상대저양가촉진VEGFmRNA적표체.④추단재소서출고양상당천저개시간점,급여항VEGF치료,유가능재일정정도상감소조산인시망막병변적발생.
