实用肝脏病杂志
實用肝髒病雜誌
실용간장병잡지
JOURNAL OF CLINICAL HEPATOLOGY
2012年
4期
327-331
,共5页
郑素军%邢欣悦%韩源平%武聚山%王世美%张莹%刘梅%陈煜%刘霜%段钟平
鄭素軍%邢訢悅%韓源平%武聚山%王世美%張瑩%劉梅%陳煜%劉霜%段鐘平
정소군%형흔열%한원평%무취산%왕세미%장형%류매%진욱%류상%단종평
HSC-T6%TGF-β1%SMAD3%增殖%细胞周期
HSC-T6%TGF-β1%SMAD3%增殖%細胞週期
HSC-T6%TGF-β1%SMAD3%증식%세포주기
目的 观察TGF-β1对大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖、细胞周期以及分泌肝纤维化相关胶原的影响.方法 采用MTT法检测细胞增殖;使用流式细胞仪检测细胞周期;采用荧光定量RT-PCR法检测SMAD3、c-myc、cdk-2、cyclinE、EGF、HGF、Bcl-2、NF-κB、MMP1、MMP9、MMP14、TIMP-1、PAI-1、α-SMA、COLⅠ及COLⅢ等基因mRNA水平;采用ELISA法检测细胞培养液COLⅠ、COLⅢ和α-SMA含量.结果 与对照组比,TGF-β1处理24h及36h时,细胞形态及生长状况均无明显变化;在24h和36h时,TGF-β1处理组细胞G0/G1期细胞比率均减少(24h:57.3±8.5% vs 60.6±9.7%;36h:53.0±2.2% vs 56.6±5.0%),S期细胞比例略高(24h:30.6±7.2% vs 26.4±10.1%;36h:35.2±3.7% vs 30.8±2.5%),但差异无统计学意义(P>0.05);TGF-β1处理组SMAD3、c-myc、cdk2、cyclin E、EGF、Bcl-2、NF-κB、TIMP1、PAI-1、α-SMA及COLⅠmRNA在24h和36h表达均上调,HGF、MMP1、MMP9、MMP14及COL ⅢmRNA在24h时表达下调,36h时表达上调;TGF-β1处理组HSC-T6细胞分泌COLⅠ[24h:(63.0±7.4ng/ml vs 33.2±10.8 ng/ml,P<0.05;36h:58.5±6.0ng/ml vs 42.2±6.3ng/ml,P<0.05];α-SMA[24h:20.6±2.6ng/ml vs 4.2±0.7ng/ml,P<0.05;36h:59.7±14.6ng/ml vs 36.8±5.6ng/ml,P<0.05)均显著增加.结论 TGF-β1对大鼠肝星状细胞系HSC-T6显示了促增殖作用,并能促进肝纤维化相关胶原的分泌.
目的 觀察TGF-β1對大鼠肝星狀細胞繫HSC-T6增殖、細胞週期以及分泌肝纖維化相關膠原的影響.方法 採用MTT法檢測細胞增殖;使用流式細胞儀檢測細胞週期;採用熒光定量RT-PCR法檢測SMAD3、c-myc、cdk-2、cyclinE、EGF、HGF、Bcl-2、NF-κB、MMP1、MMP9、MMP14、TIMP-1、PAI-1、α-SMA、COLⅠ及COLⅢ等基因mRNA水平;採用ELISA法檢測細胞培養液COLⅠ、COLⅢ和α-SMA含量.結果 與對照組比,TGF-β1處理24h及36h時,細胞形態及生長狀況均無明顯變化;在24h和36h時,TGF-β1處理組細胞G0/G1期細胞比率均減少(24h:57.3±8.5% vs 60.6±9.7%;36h:53.0±2.2% vs 56.6±5.0%),S期細胞比例略高(24h:30.6±7.2% vs 26.4±10.1%;36h:35.2±3.7% vs 30.8±2.5%),但差異無統計學意義(P>0.05);TGF-β1處理組SMAD3、c-myc、cdk2、cyclin E、EGF、Bcl-2、NF-κB、TIMP1、PAI-1、α-SMA及COLⅠmRNA在24h和36h錶達均上調,HGF、MMP1、MMP9、MMP14及COL ⅢmRNA在24h時錶達下調,36h時錶達上調;TGF-β1處理組HSC-T6細胞分泌COLⅠ[24h:(63.0±7.4ng/ml vs 33.2±10.8 ng/ml,P<0.05;36h:58.5±6.0ng/ml vs 42.2±6.3ng/ml,P<0.05];α-SMA[24h:20.6±2.6ng/ml vs 4.2±0.7ng/ml,P<0.05;36h:59.7±14.6ng/ml vs 36.8±5.6ng/ml,P<0.05)均顯著增加.結論 TGF-β1對大鼠肝星狀細胞繫HSC-T6顯示瞭促增殖作用,併能促進肝纖維化相關膠原的分泌.
목적 관찰TGF-β1대대서간성상세포계HSC-T6증식、세포주기이급분비간섬유화상관효원적영향.방법 채용MTT법검측세포증식;사용류식세포의검측세포주기;채용형광정량RT-PCR법검측SMAD3、c-myc、cdk-2、cyclinE、EGF、HGF、Bcl-2、NF-κB、MMP1、MMP9、MMP14、TIMP-1、PAI-1、α-SMA、COLⅠ급COLⅢ등기인mRNA수평;채용ELISA법검측세포배양액COLⅠ、COLⅢ화α-SMA함량.결과 여대조조비,TGF-β1처리24h급36h시,세포형태급생장상황균무명현변화;재24h화36h시,TGF-β1처리조세포G0/G1기세포비솔균감소(24h:57.3±8.5% vs 60.6±9.7%;36h:53.0±2.2% vs 56.6±5.0%),S기세포비례략고(24h:30.6±7.2% vs 26.4±10.1%;36h:35.2±3.7% vs 30.8±2.5%),단차이무통계학의의(P>0.05);TGF-β1처리조SMAD3、c-myc、cdk2、cyclin E、EGF、Bcl-2、NF-κB、TIMP1、PAI-1、α-SMA급COLⅠmRNA재24h화36h표체균상조,HGF、MMP1、MMP9、MMP14급COL ⅢmRNA재24h시표체하조,36h시표체상조;TGF-β1처리조HSC-T6세포분비COLⅠ[24h:(63.0±7.4ng/ml vs 33.2±10.8 ng/ml,P<0.05;36h:58.5±6.0ng/ml vs 42.2±6.3ng/ml,P<0.05];α-SMA[24h:20.6±2.6ng/ml vs 4.2±0.7ng/ml,P<0.05;36h:59.7±14.6ng/ml vs 36.8±5.6ng/ml,P<0.05)균현저증가.결론 TGF-β1대대서간성상세포계HSC-T6현시료촉증식작용,병능촉진간섬유화상관효원적분비.
