中国畜牧杂志
中國畜牧雜誌
중국축목잡지
CHINESE JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE
2013年
9期
38-41
,共4页
庞学燕%季昀%田青%王洪荣
龐學燕%季昀%田青%王洪榮
방학연%계윤%전청%왕홍영
乳腺上皮细胞%CSN3%κ-酪蛋白%mTOR%细胞增殖%奶牛
乳腺上皮細胞%CSN3%κ-酪蛋白%mTOR%細胞增殖%奶牛
유선상피세포%CSN3%κ-락단백%mTOR%세포증식%내우
本研究旨在探讨其他氨基酸缺乏条件下补充亮氨酸对奶牛乳腺上皮细胞κ-酪蛋白基因表达和蛋白合成以及细胞增殖的影响,并从mRNA水平探究mTOR信号通路介导的蛋白质合成的重要性.处理组1在对照组(稀释100倍的培养基)的基础上补充亮氨酸,处理组2在处理组1的基础上添加mTOR信号通路上游抑制剂,分别采用RT-qPCR技术和ELISA法测定基因的相对表达量和蛋白合成量,CCK-8法测定细胞增殖.结果表明:亮氨酸显著促进了κ-酪蛋白基因表达和蛋白合成(P＜0.05),而添加抑制剂极显著降低了这种作用(P＜0.01)；各处理对蛋白质合成信号通路相关基因mTOR、S6K1、4EBP1、eIF4E、eEF2相对表达量均有一定影响;抑制剂能显著抑制细胞增殖(P＜0.05).结果提示,补充亮氨酸能显著促进κ--酪蛋白的合成,这可能与mTOR信号通路介导蛋白质合成有关,此外,mTOR信号通路也可调控奶牛乳腺上皮细胞的增殖.
本研究旨在探討其他氨基痠缺乏條件下補充亮氨痠對奶牛乳腺上皮細胞κ-酪蛋白基因錶達和蛋白閤成以及細胞增殖的影響,併從mRNA水平探究mTOR信號通路介導的蛋白質閤成的重要性.處理組1在對照組(稀釋100倍的培養基)的基礎上補充亮氨痠,處理組2在處理組1的基礎上添加mTOR信號通路上遊抑製劑,分彆採用RT-qPCR技術和ELISA法測定基因的相對錶達量和蛋白閤成量,CCK-8法測定細胞增殖.結果錶明:亮氨痠顯著促進瞭κ-酪蛋白基因錶達和蛋白閤成(P＜0.05),而添加抑製劑極顯著降低瞭這種作用(P＜0.01)；各處理對蛋白質閤成信號通路相關基因mTOR、S6K1、4EBP1、eIF4E、eEF2相對錶達量均有一定影響;抑製劑能顯著抑製細胞增殖(P＜0.05).結果提示,補充亮氨痠能顯著促進κ--酪蛋白的閤成,這可能與mTOR信號通路介導蛋白質閤成有關,此外,mTOR信號通路也可調控奶牛乳腺上皮細胞的增殖.
본연구지재탐토기타안기산결핍조건하보충량안산대내우유선상피세포κ-락단백기인표체화단백합성이급세포증식적영향,병종mRNA수평탐구mTOR신호통로개도적단백질합성적중요성.처리조1재대조조(희석100배적배양기)적기출상보충량안산,처리조2재처리조1적기출상첨가mTOR신호통로상유억제제,분별채용RT-qPCR기술화ELISA법측정기인적상대표체량화단백합성량,CCK-8법측정세포증식.결과표명:량안산현저촉진료κ-락단백기인표체화단백합성(P＜0.05),이첨가억제제겁현저강저료저충작용(P＜0.01)；각처리대단백질합성신호통로상관기인mTOR、S6K1、4EBP1、eIF4E、eEF2상대표체량균유일정영향;억제제능현저억제세포증식(P＜0.05).결과제시,보충량안산능현저촉진κ--락단백적합성,저가능여mTOR신호통로개도단백질합성유관,차외,mTOR신호통로야가조공내우유선상피세포적증식.
