中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2012年
7期
1157-1159
,共3页
HIV-1%病毒蛋白R%大肠癌%细胞周期G2停滞%细胞凋亡%存活素
HIV-1%病毒蛋白R%大腸癌%細胞週期G2停滯%細胞凋亡%存活素
HIV-1%병독단백R%대장암%세포주기G2정체%세포조망%존활소
目的 观察I型人类免疫缺陷病毒蛋白R(Viral protein R 、Vpr)在体外对大肠癌细胞HT-29增殖抑制及探索Vpr对HT-29细胞存活素(Survivin)表达的调节作用.方法 应用腺病毒转染系统将Vpr基因以不同感染复数转染至HT-29细胞.MTT法检测Vpr对HT-29细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡变化.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(western blot)法检测mRNA水平和蛋白水平上Survivin的表达.结果 实验组可见Vpr蛋白的表达;实验组大肠癌细胞HT-29增殖受到抑制(MOI=200),从转染72 h开始,实验组MTT值与对照组及空载体组比较差异均具有有统计学意义(P<0.05),随着时间的延长,抑制逐渐增强;转染72 h后(MOI=200),实验组细胞凋亡率与对照组及空载体组比较均差异具有显著统计学意义(P＜0.01);实验组处于G2/M期细胞比例与对照组及空载体组比较均差异具有统计学意义(P＜0.05);转染72 h后,实验组(MOI=50)Survivin基因的mRNA水平及蛋白表达水平与对照组及空载体组(MOI=200)比较均差异具有统计学意义(P＜0.05 或P＜0.01),并且survivin的表达随着MOI的增加而减弱.结论 Vpr体外可以诱导细胞HT-29 G2/M期阻滞及凋亡从而有效抑制细胞HT-29增殖,其机制可能与Vpr下调Survivin基因的表达有关.Vpr在大肠癌的治疗中具有潜在的应用前景.
目的 觀察I型人類免疫缺陷病毒蛋白R(Viral protein R 、Vpr)在體外對大腸癌細胞HT-29增殖抑製及探索Vpr對HT-29細胞存活素(Survivin)錶達的調節作用.方法 應用腺病毒轉染繫統將Vpr基因以不同感染複數轉染至HT-29細胞.MTT法檢測Vpr對HT-29細胞的增殖抑製作用;流式細胞儀檢測細胞週期及細胞凋亡變化.逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和免疫印跡(western blot)法檢測mRNA水平和蛋白水平上Survivin的錶達.結果 實驗組可見Vpr蛋白的錶達;實驗組大腸癌細胞HT-29增殖受到抑製(MOI=200),從轉染72 h開始,實驗組MTT值與對照組及空載體組比較差異均具有有統計學意義(P<0.05),隨著時間的延長,抑製逐漸增彊;轉染72 h後(MOI=200),實驗組細胞凋亡率與對照組及空載體組比較均差異具有顯著統計學意義(P＜0.01);實驗組處于G2/M期細胞比例與對照組及空載體組比較均差異具有統計學意義(P＜0.05);轉染72 h後,實驗組(MOI=50)Survivin基因的mRNA水平及蛋白錶達水平與對照組及空載體組(MOI=200)比較均差異具有統計學意義(P＜0.05 或P＜0.01),併且survivin的錶達隨著MOI的增加而減弱.結論 Vpr體外可以誘導細胞HT-29 G2/M期阻滯及凋亡從而有效抑製細胞HT-29增殖,其機製可能與Vpr下調Survivin基因的錶達有關.Vpr在大腸癌的治療中具有潛在的應用前景.
목적 관찰I형인류면역결함병독단백R(Viral protein R 、Vpr)재체외대대장암세포HT-29증식억제급탐색Vpr대HT-29세포존활소(Survivin)표체적조절작용.방법 응용선병독전염계통장Vpr기인이불동감염복수전염지HT-29세포.MTT법검측Vpr대HT-29세포적증식억제작용;류식세포의검측세포주기급세포조망변화.역전록-취합매련반응(RT-PCR)화면역인적(western blot)법검측mRNA수평화단백수평상Survivin적표체.결과 실험조가견Vpr단백적표체;실험조대장암세포HT-29증식수도억제(MOI=200),종전염72 h개시,실험조MTT치여대조조급공재체조비교차이균구유유통계학의의(P<0.05),수착시간적연장,억제축점증강;전염72 h후(MOI=200),실험조세포조망솔여대조조급공재체조비교균차이구유현저통계학의의(P＜0.01);실험조처우G2/M기세포비례여대조조급공재체조비교균차이구유통계학의의(P＜0.05);전염72 h후,실험조(MOI=50)Survivin기인적mRNA수평급단백표체수평여대조조급공재체조(MOI=200)비교균차이구유통계학의의(P＜0.05 혹P＜0.01),병차survivin적표체수착MOI적증가이감약.결론 Vpr체외가이유도세포HT-29 G2/M기조체급조망종이유효억제세포HT-29증식,기궤제가능여Vpr하조Survivin기인적표체유관.Vpr재대장암적치료중구유잠재적응용전경.
