CAJ | 학술논문

背景:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体可以通过上调死亡受体5 蛋白的表达诱导大鼠肝星状细胞凋亡.目的:观察大鼠骨髓间充质干细胞对肝星状细胞死亡受体5 和Caspase-3 蛋白表达的影响,探讨骨髓间充质干细胞诱导肝星状细胞凋亡及其机制.方法:贴壁筛选法培养、纯化SD 大鼠骨髓间充质干细胞,传至第3 代使用;大鼠原代肝星状细胞和肝纤维原细胞系冻融后传代使用.应用6 孔培养板,建立上下双层细胞共培养体系,常规培养.将细胞分为4 组:①空白对照组:肝星状细胞和骨髓间充质干细胞分别单独培养.②阴性对照组:肝纤维原细胞与肝星状细胞共培养(模拟星状细胞体内生长环境).③骨髓间充质干细胞与肝星状细胞共培养组.④实验组:1.5 mg/L TRAIL 多克隆抗体与骨髓间充质干细胞作用6 h 后,不换液,再与肝星状细胞共培养.结果与结论:在共培养组中肝星状细胞的增殖降低,凋亡增加,且肝星状细胞死亡受体5、Caspase-3 蛋白的表达均显著升高,并呈时间依赖性,且与其他组比较差异有显著性意义(P < 0.01).实验组Caspase-3 和死亡受体5 蛋白的表达在共培养的各个时间段均低于共培养组,与共培养组比较差异有显著性意义(P < 0.01).提示骨髓间充质干细胞与肝星状细胞共培养能抑制肝星状细胞的增殖,促进肝星状细胞的凋亡,其机制可能为骨髓间充质干细胞旁分泌肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体通过上调Caspase-3 和死亡受体5 蛋白的表达实现的.
배경:종류배사인자상관조망유도배체가이통과상조사망수체5 단백적표체유도대서간성상세포조망.목적:관찰대서골수간충질간세포대간성상세포사망수체5 화Caspase-3 단백표체적영향,탐토골수간충질간세포유도간성상세포조망급기궤제.방법:첩벽사선법배양、순화SD 대서골수간충질간세포,전지제3 대사용;대서원대간성상세포화간섬유원세포계동융후전대사용.응용6 공배양판,건립상하쌍층세포공배양체계,상규배양.장세포분위4 조:①공백대조조:간성상세포화골수간충질간세포분별단독배양.②음성대조조:간섬유원세포여간성상세포공배양(모의성상세포체내생장배경).③골수간충질간세포여간성상세포공배양조.④실험조:1.5 mg/L TRAIL 다극륭항체여골수간충질간세포작용6 h 후,불환액,재여간성상세포공배양.결과여결론:재공배양조중간성상세포적증식강저,조망증가,차간성상세포사망수체5、Caspase-3 단백적표체균현저승고,병정시간의뢰성,차여기타조비교차이유현저성의의(P < 0.01).실험조Caspase-3 화사망수체5 단백적표체재공배양적각개시간단균저우공배양조,여공배양조비교차이유현저성의의(P < 0.01).제시골수간충질간세포여간성상세포공배양능억제간성상세포적증식,촉진간성상세포적조망,기궤제가능위골수간충질간세포방분비종류배사인자상관조망유도배체통과상조Caspase-3 화사망수체5 단백적표체실현적.