中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
27期
4941-4946
,共6页
史筱璐%段礼府%马艳%毕晓娟%刘立中
史篠璐%段禮府%馬豔%畢曉娟%劉立中
사소로%단례부%마염%필효연%류립중
豚鼠%骨髓间充质干细胞%细胞培养%成骨诱导%脂肪细胞%干细胞
豚鼠%骨髓間充質榦細胞%細胞培養%成骨誘導%脂肪細胞%榦細胞
돈서%골수간충질간세포%세포배양%성골유도%지방세포%간세포
背景:利用骨髓间充质干细胞的取材灵活性及快捷性,对已掌握的培养技术及成骨诱导进一步探索性研究.目的:通过建立豚鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养法,探讨豚鼠骨髓间充质干细胞表型特征以及多项分化潜能.方法:利用贴壁培养法分离纯化豚鼠骨髓间充质干细胞,传代扩增,流式细胞分析检测细胞表面分子CD29、CD44、CD45的表达.分别采用成骨诱导培养液和成脂诱导培养液定向诱导骨髓间充质干细胞向脂肪细胞、成骨细胞分化.结果与结论:原代分离的骨髓间充质干细胞在接种后96 h贴壁,细胞形态为椭圆形,多角形及短梭形,8 d时细胞呈长梭形并达到90%单层融合.经传代扩增,细胞进一步纯化,细胞形态为均一的长梭形并呈漩涡状排列,而且生长速率加快.流式细胞检测 CD29、CD44阳性率分别为95.7%和65.7%.不同诱导剂定向诱导后,经油红O、茜素红S、碱性磷酸酶染色、免疫组织化学Ι型胶原酶鉴定,P3代骨髓间充质干细胞分别向脂肪细胞及成骨细胞分化.结果表明,通过贴壁筛选方法,体外分离培养的豚鼠骨髓间充质干细胞具有很强的增殖能力,并保持稳定的表型特征及多向分化潜能.
揹景:利用骨髓間充質榦細胞的取材靈活性及快捷性,對已掌握的培養技術及成骨誘導進一步探索性研究.目的:通過建立豚鼠骨髓間充質榦細胞的體外分離培養法,探討豚鼠骨髓間充質榦細胞錶型特徵以及多項分化潛能.方法:利用貼壁培養法分離純化豚鼠骨髓間充質榦細胞,傳代擴增,流式細胞分析檢測細胞錶麵分子CD29、CD44、CD45的錶達.分彆採用成骨誘導培養液和成脂誘導培養液定嚮誘導骨髓間充質榦細胞嚮脂肪細胞、成骨細胞分化.結果與結論:原代分離的骨髓間充質榦細胞在接種後96 h貼壁,細胞形態為橢圓形,多角形及短梭形,8 d時細胞呈長梭形併達到90%單層融閤.經傳代擴增,細胞進一步純化,細胞形態為均一的長梭形併呈漩渦狀排列,而且生長速率加快.流式細胞檢測 CD29、CD44暘性率分彆為95.7%和65.7%.不同誘導劑定嚮誘導後,經油紅O、茜素紅S、堿性燐痠酶染色、免疫組織化學Ι型膠原酶鑒定,P3代骨髓間充質榦細胞分彆嚮脂肪細胞及成骨細胞分化.結果錶明,通過貼壁篩選方法,體外分離培養的豚鼠骨髓間充質榦細胞具有很彊的增殖能力,併保持穩定的錶型特徵及多嚮分化潛能.
배경:이용골수간충질간세포적취재령활성급쾌첩성,대이장악적배양기술급성골유도진일보탐색성연구.목적:통과건립돈서골수간충질간세포적체외분리배양법,탐토돈서골수간충질간세포표형특정이급다항분화잠능.방법:이용첩벽배양법분리순화돈서골수간충질간세포,전대확증,류식세포분석검측세포표면분자CD29、CD44、CD45적표체.분별채용성골유도배양액화성지유도배양액정향유도골수간충질간세포향지방세포、성골세포분화.결과여결론:원대분리적골수간충질간세포재접충후96 h첩벽,세포형태위타원형,다각형급단사형,8 d시세포정장사형병체도90%단층융합.경전대확증,세포진일보순화,세포형태위균일적장사형병정선와상배렬,이차생장속솔가쾌.류식세포검측 CD29、CD44양성솔분별위95.7%화65.7%.불동유도제정향유도후,경유홍O、천소홍S、감성린산매염색、면역조직화학Ι형효원매감정,P3대골수간충질간세포분별향지방세포급성골세포분화.결과표명,통과첩벽사선방법,체외분리배양적돈서골수간충질간세포구유흔강적증식능력,병보지은정적표형특정급다향분화잠능.