林业科技开发
林業科技開髮
임업과기개발
CHINA FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2013年
1期
15-18
,共4页
何卫龙%杨立恒%王晓锋%林能庆%季孔庶
何衛龍%楊立恆%王曉鋒%林能慶%季孔庶
하위룡%양립항%왕효봉%림능경%계공서
马尾松%胚乳DNA%CTAB-SDS法%SSR-PCR
馬尾鬆%胚乳DNA%CTAB-SDS法%SSR-PCR
마미송%배유DNA%CTAB-SDS법%SSR-PCR
以马尾松胚乳为试验材料,用CTAB-SDS法提取单粒胚乳DNA,对其浓度和纯度进行检测.结果表明:运用CTAB-SDS法提取的马尾松胚乳DNA浓度高、纯度好,琼脂糖凝胶电泳条带清晰,点样孔干净.此外,还对影响PCR结果的Mg2+、dNTP、模板DNA、引物浓度、TaqDNA聚合酶5个因素进行了正交设计试验,建立了适合马尾松SSR-PCR的反应体系:即在10μL反应体系中,Mg2+浓度为2.80 mmol/L,dNTP浓度为0.35 mmol/L,引物浓度为0.075 μmol/L,模板DNA浓度为20 ng/10μL,TaqDNA聚合酶浓度为0.50 U/10 μL.
以馬尾鬆胚乳為試驗材料,用CTAB-SDS法提取單粒胚乳DNA,對其濃度和純度進行檢測.結果錶明:運用CTAB-SDS法提取的馬尾鬆胚乳DNA濃度高、純度好,瓊脂糖凝膠電泳條帶清晰,點樣孔榦淨.此外,還對影響PCR結果的Mg2+、dNTP、模闆DNA、引物濃度、TaqDNA聚閤酶5箇因素進行瞭正交設計試驗,建立瞭適閤馬尾鬆SSR-PCR的反應體繫:即在10μL反應體繫中,Mg2+濃度為2.80 mmol/L,dNTP濃度為0.35 mmol/L,引物濃度為0.075 μmol/L,模闆DNA濃度為20 ng/10μL,TaqDNA聚閤酶濃度為0.50 U/10 μL.
이마미송배유위시험재료,용CTAB-SDS법제취단립배유DNA,대기농도화순도진행검측.결과표명:운용CTAB-SDS법제취적마미송배유DNA농도고、순도호,경지당응효전영조대청석,점양공간정.차외,환대영향PCR결과적Mg2+、dNTP、모판DNA、인물농도、TaqDNA취합매5개인소진행료정교설계시험,건립료괄합마미송SSR-PCR적반응체계:즉재10μL반응체계중,Mg2+농도위2.80 mmol/L,dNTP농도위0.35 mmol/L,인물농도위0.075 μmol/L,모판DNA농도위20 ng/10μL,TaqDNA취합매농도위0.50 U/10 μL.
