广西医科大学学报
廣西醫科大學學報
엄서의과대학학보
JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY
2013年
2期
180-183
,共4页
增强型绿色荧光蛋白%融合基因%表达载体%类枯草菌素蛋白酶基因
增彊型綠色熒光蛋白%融閤基因%錶達載體%類枯草菌素蛋白酶基因
증강형록색형광단백%융합기인%표체재체%류고초균소단백매기인
enhanced green fluorescent protein%fusion gene%expression vector%Pr1 gene
目的:以增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)基因为报告基因,类枯草菌素蛋白酶(subtilisin-like protease,Pr1)基因为目的基因,分别构建含有EGFP-Pr1和Pr1-EGFP融合基因的原核表达载体.方法:将Pr1基因分别连接到EGFP基因的上游和下游,插入质粒pTWIN1,构建表达载体pEGFP-Pr1和pPr1-EGFP.结果:经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,重组菌株在长波紫外线的照射下,均能发出明亮的绿色荧光,并且诱导菌株破碎后均可检测到Pr1蛋白酶的活性.结论:应用基因工程技术成功构建pPr1-EGFP和pEGFP-Pr1融合基因表达载体,EGFP作为Pr1生物标记分子,有利于进一步开展Pr1基因的特异性功能研究.
目的:以增彊型綠色熒光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)基因為報告基因,類枯草菌素蛋白酶(subtilisin-like protease,Pr1)基因為目的基因,分彆構建含有EGFP-Pr1和Pr1-EGFP融閤基因的原覈錶達載體.方法:將Pr1基因分彆連接到EGFP基因的上遊和下遊,插入質粒pTWIN1,構建錶達載體pEGFP-Pr1和pPr1-EGFP.結果:經異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導後,重組菌株在長波紫外線的照射下,均能髮齣明亮的綠色熒光,併且誘導菌株破碎後均可檢測到Pr1蛋白酶的活性.結論:應用基因工程技術成功構建pPr1-EGFP和pEGFP-Pr1融閤基因錶達載體,EGFP作為Pr1生物標記分子,有利于進一步開展Pr1基因的特異性功能研究.
목적:이증강형록색형광단백(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)기인위보고기인,류고초균소단백매(subtilisin-like protease,Pr1)기인위목적기인,분별구건함유EGFP-Pr1화Pr1-EGFP융합기인적원핵표체재체.방법:장Pr1기인분별련접도EGFP기인적상유화하유,삽입질립pTWIN1,구건표체재체pEGFP-Pr1화pPr1-EGFP.결과:경이병기류대반유당감(IPTG)유도후,중조균주재장파자외선적조사하,균능발출명량적록색형광,병차유도균주파쇄후균가검측도Pr1단백매적활성.결론:응용기인공정기술성공구건pPr1-EGFP화pEGFP-Pr1융합기인표체재체,EGFP작위Pr1생물표기분자,유리우진일보개전Pr1기인적특이성공능연구.
