水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2012年
6期
1048-1055
,共8页
胡宝庆%文春根%裴鹏祖%谢彦海
鬍寶慶%文春根%裴鵬祖%謝彥海
호보경%문춘근%배붕조%사언해
褶纹冠蚌%过氧化物还原酶6%组织表达%原核表达
褶紋冠蚌%過氧化物還原酶6%組織錶達%原覈錶達
습문관방%과양화물환원매6%조직표체%원핵표체
过氧化物还原酶6具有谷胱甘肽过氧化物酶和磷脂酶A2的双重活性,在机体抗氧化保护及肺表面活性物质代谢中具有重要的作用.研究克隆和分析了褶纹冠蚌Prx6 (CpPrx6) 基因的cDNA序列特征.结果表明CpPrx6基因的cDNA全长1617 bp; 其中5′端非翻译区为71 bp,3′端非翻译区为889 bp,开放阅读框为657 bp,可以编码218个氨基酸.CpPrx6氨基酸序列与其他已知贝类Prx6的同源性为70%-72%.CpPrx6蛋白含有1-Cys 型Prx共有的保守催化中心"PVCTTE"和脂肪酶基序"GKSWA",三级结构中包含6个α螺旋、12个β折叠,催化中心位于第5个α螺旋内.CpPrx6基因在褶纹冠蚌血细胞、外套膜、闭壳肌、肝胰腺、鳃等组织中均有表达,其中鳃的表达量最大.嗜水气单胞菌刺激后6h和12h时CpPrx6在肝胰腺中的表达量明显增加 (6h,P<0.05; 12h,P<0.01),在血细胞和鳃组织中12h的表达量增加,24h时恢复到正常水平.将CpPrx6基因亚克隆到pET-32a(+) 质粒中构建了重组质粒,SDS-PAGE分析发现重组质粒在大肠杆菌DE3中获得了表达.
過氧化物還原酶6具有穀胱甘肽過氧化物酶和燐脂酶A2的雙重活性,在機體抗氧化保護及肺錶麵活性物質代謝中具有重要的作用.研究剋隆和分析瞭褶紋冠蚌Prx6 (CpPrx6) 基因的cDNA序列特徵.結果錶明CpPrx6基因的cDNA全長1617 bp; 其中5′耑非翻譯區為71 bp,3′耑非翻譯區為889 bp,開放閱讀框為657 bp,可以編碼218箇氨基痠.CpPrx6氨基痠序列與其他已知貝類Prx6的同源性為70%-72%.CpPrx6蛋白含有1-Cys 型Prx共有的保守催化中心"PVCTTE"和脂肪酶基序"GKSWA",三級結構中包含6箇α螺鏇、12箇β摺疊,催化中心位于第5箇α螺鏇內.CpPrx6基因在褶紋冠蚌血細胞、外套膜、閉殼肌、肝胰腺、鰓等組織中均有錶達,其中鰓的錶達量最大.嗜水氣單胞菌刺激後6h和12h時CpPrx6在肝胰腺中的錶達量明顯增加 (6h,P<0.05; 12h,P<0.01),在血細胞和鰓組織中12h的錶達量增加,24h時恢複到正常水平.將CpPrx6基因亞剋隆到pET-32a(+) 質粒中構建瞭重組質粒,SDS-PAGE分析髮現重組質粒在大腸桿菌DE3中穫得瞭錶達.
과양화물환원매6구유곡광감태과양화물매화린지매A2적쌍중활성,재궤체항양화보호급폐표면활성물질대사중구유중요적작용.연구극륭화분석료습문관방Prx6 (CpPrx6) 기인적cDNA서렬특정.결과표명CpPrx6기인적cDNA전장1617 bp; 기중5′단비번역구위71 bp,3′단비번역구위889 bp,개방열독광위657 bp,가이편마218개안기산.CpPrx6안기산서렬여기타이지패류Prx6적동원성위70%-72%.CpPrx6단백함유1-Cys 형Prx공유적보수최화중심"PVCTTE"화지방매기서"GKSWA",삼급결구중포함6개α라선、12개β절첩,최화중심위우제5개α라선내.CpPrx6기인재습문관방혈세포、외투막、폐각기、간이선、새등조직중균유표체,기중새적표체량최대.기수기단포균자격후6h화12h시CpPrx6재간이선중적표체량명현증가 (6h,P<0.05; 12h,P<0.01),재혈세포화새조직중12h적표체량증가,24h시회복도정상수평.장CpPrx6기인아극륭도pET-32a(+) 질립중구건료중조질립,SDS-PAGE분석발현중조질립재대장간균DE3중획득료표체.
