中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2009年
5期
378-381,封3
,共5页
钟沁萍%明珍平%蒋明森%董惠芬
鐘沁萍%明珍平%蔣明森%董惠芬
종심평%명진평%장명삼%동혜분
日本血吸虫%培养细胞%相关嗜银蛋白%甲基硝基亚硝基胍
日本血吸蟲%培養細胞%相關嗜銀蛋白%甲基硝基亞硝基胍
일본혈흡충%배양세포%상관기은단백%갑기초기아초기고
目的 观察甲基硝基亚硝基胍(MNNG)诱导后日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)含量的动态变化,探讨MNNG诱导后培养细胞的增殖能力.方法 将日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上,置于含20%小牛血清附加常量抗生素的RPMI-1640常规培养基中培养;培养第4天,细胞随机分为实验组和对照组两组,实验组细胞以含3 g/ml MNNG的常规培养基处珲48 h,对照组细胞则用不含MNNG的常规培养基作相同处理.细胞经彻底清洗后继续以常规培养基培养3周,然后换用含5%小牛血清的低血清培养基培养.MNNG处理后第1～9周,每周实验组和对照组细胞采用略作修改的胶银法进行Ag-NORs染色,光镜下观察与拍照,HPIAS-2000图像分析仪测定代表培养细胞内Ag-NORs含量的吸光度(A)值,并进行统计学分析.结果 培养过程中,对照组细胞着色逐渐变浅,MNNG组细胞除在第2 周时着色变浅外,其余均逐渐加深,尤其在第6周(MNNG诱导后第5周),细胞核呈深棕色,可见粗大的银染颗粒,核仁呈黑色,并观察到分裂细胞.第7～9周,两组细胞着色均逐渐,变浅.定量分析发现,对照组细胞在培养初期Ag-NORs含量最高,随后逐渐降低;MNNG组的Ag-NORs含量在培养第2周时稍有降低,随后逐渐升高;在培养第6周即MNNG诱导后第5周时达到高峰,然后又逐渐下降.结论 MNNG诱导可显著增强培养细胞的rDNA转录活性,提高细胞的分裂增殖能力,在MNNG诱导后第5周细胞增殖能力最强.
目的 觀察甲基硝基亞硝基胍(MNNG)誘導後日本血吸蟲成蟲培養細胞覈仁組織區相關嗜銀蛋白(Ag-NORs)含量的動態變化,探討MNNG誘導後培養細胞的增殖能力.方法 將日本血吸蟲成蟲細胞接種于小蓋玻片上,置于含20%小牛血清附加常量抗生素的RPMI-1640常規培養基中培養;培養第4天,細胞隨機分為實驗組和對照組兩組,實驗組細胞以含3 g/ml MNNG的常規培養基處琿48 h,對照組細胞則用不含MNNG的常規培養基作相同處理.細胞經徹底清洗後繼續以常規培養基培養3週,然後換用含5%小牛血清的低血清培養基培養.MNNG處理後第1～9週,每週實驗組和對照組細胞採用略作脩改的膠銀法進行Ag-NORs染色,光鏡下觀察與拍照,HPIAS-2000圖像分析儀測定代錶培養細胞內Ag-NORs含量的吸光度(A)值,併進行統計學分析.結果 培養過程中,對照組細胞著色逐漸變淺,MNNG組細胞除在第2 週時著色變淺外,其餘均逐漸加深,尤其在第6週(MNNG誘導後第5週),細胞覈呈深棕色,可見粗大的銀染顆粒,覈仁呈黑色,併觀察到分裂細胞.第7～9週,兩組細胞著色均逐漸,變淺.定量分析髮現,對照組細胞在培養初期Ag-NORs含量最高,隨後逐漸降低;MNNG組的Ag-NORs含量在培養第2週時稍有降低,隨後逐漸升高;在培養第6週即MNNG誘導後第5週時達到高峰,然後又逐漸下降.結論 MNNG誘導可顯著增彊培養細胞的rDNA轉錄活性,提高細胞的分裂增殖能力,在MNNG誘導後第5週細胞增殖能力最彊.
목적 관찰갑기초기아초기고(MNNG)유도후일본혈흡충성충배양세포핵인조직구상관기은단백(Ag-NORs)함량적동태변화,탐토MNNG유도후배양세포적증식능력.방법 장일본혈흡충성충세포접충우소개파편상,치우함20%소우혈청부가상량항생소적RPMI-1640상규배양기중배양;배양제4천,세포수궤분위실험조화대조조량조,실험조세포이함3 g/ml MNNG적상규배양기처혼48 h,대조조세포칙용불함MNNG적상규배양기작상동처리.세포경철저청세후계속이상규배양기배양3주,연후환용함5%소우혈청적저혈청배양기배양.MNNG처리후제1～9주,매주실험조화대조조세포채용략작수개적효은법진행Ag-NORs염색,광경하관찰여박조,HPIAS-2000도상분석의측정대표배양세포내Ag-NORs함량적흡광도(A)치,병진행통계학분석.결과 배양과정중,대조조세포착색축점변천,MNNG조세포제재제2 주시착색변천외,기여균축점가심,우기재제6주(MNNG유도후제5주),세포핵정심종색,가견조대적은염과립,핵인정흑색,병관찰도분렬세포.제7～9주,량조세포착색균축점,변천.정량분석발현,대조조세포재배양초기Ag-NORs함량최고,수후축점강저;MNNG조적Ag-NORs함량재배양제2주시초유강저,수후축점승고;재배양제6주즉MNNG유도후제5주시체도고봉,연후우축점하강.결론 MNNG유도가현저증강배양세포적rDNA전록활성,제고세포적분렬증식능력,재MNNG유도후제5주세포증식능력최강.
