CAJ | 학술논문

应用RACE法从刺参Apostichopus japonicus体腔细胞中克隆出26S蛋白酶体组成19S亚复合体亚基之一的S7亚基基因(GenBank登录号:JQ922514).该基因的cDNA序列全长为2 445 bp,其中5'UTR为70bp,3'UTR为1 070 bp,开放阅读框为1 305 bp,编码435个氨基酸;保守区具有典型的ATP结合和水解基序,氨基酸序列分别为GPPGTGKT和DEID,具有MAT和VRPGRLDR的RNA/DNA螺旋酶的特征性基序;刺参26S蛋白酶体S7亚基基因与紫海胆的氨基酸序列同源性最高(95％),与脊椎动物、节肢动物的同源性较高(88％～89％),与线虫、拟南芥和酵母同源性较低(85％、77％和73％);S7亚基编码的蛋白没有信号肽,也没有跨膜结构域,为非跨膜蛋白,定位于细胞中的液态基质中.采用实时定量PCR方法检测了26S蛋白酶体S7亚基基因在刺参5种组织中的表达情况,结果显示,在肠、呼吸树、表皮、体腔细胞、纵肌中26S蛋白酶体S7基因均有明显表达,且体腔细胞中表达量最高,其次是纵肌和肠,在体壁和呼吸树中表达量较低.本研究中首次在刺参体内发现并克隆了26S蛋白酶体S7亚基基因,同时采用Real-timePCR技术对该基因的表达部位进行了研究,所得结果将为研究棘皮动物蛋白质代谢途径提供新的着眼点,为刺参生理功能的调控研究奠定了基础.
응용RACE법종자삼Apostichopus japonicus체강세포중극륭출26S단백매체조성19S아복합체아기지일적S7아기기인(GenBank등록호:JQ922514).해기인적cDNA서렬전장위2 445 bp,기중5'UTR위70bp,3'UTR위1 070 bp,개방열독광위1 305 bp,편마435개안기산;보수구구유전형적ATP결합화수해기서,안기산서렬분별위GPPGTGKT화DEID,구유MAT화VRPGRLDR적RNA/DNA라선매적특정성기서;자삼26S단백매체S7아기기인여자해담적안기산서렬동원성최고(95％),여척추동물、절지동물적동원성교고(88％～89％),여선충、의남개화효모동원성교저(85％、77％화73％);S7아기편마적단백몰유신호태,야몰유과막결구역,위비과막단백,정위우세포중적액태기질중.채용실시정량PCR방법검측료26S단백매체S7아기기인재자삼5충조직중적표체정황,결과현시,재장、호흡수、표피、체강세포、종기중26S단백매체S7기인균유명현표체,차체강세포중표체량최고,기차시종기화장,재체벽화호흡수중표체량교저.본연구중수차재자삼체내발현병극륭료26S단백매체S7아기기인,동시채용Real-timePCR기술대해기인적표체부위진행료연구,소득결과장위연구극피동물단백질대사도경제공신적착안점,위자삼생리공능적조공연구전정료기출.