大连海洋大学学报
大連海洋大學學報
대련해양대학학보
JOURNAL OF DALIAN FISHERIES UNIVERSITY
2013年
6期
522-527
,共6页
李成泽%王晓燕%丁君%常亚青
李成澤%王曉燕%丁君%常亞青
리성택%왕효연%정군%상아청
刺参%耐寒基因%抑制消减杂交
刺參%耐寒基因%抑製消減雜交
자삼%내한기인%억제소감잡교
Apostichopus japonicus%gene for cold temperature stress%suppression subtractive hybridization
利用抑制性消减杂交(Suppression subtractive hybridization,SSH)技术,对刺参A0ostichopus japonicus耐低温性状相关的基因进行研究.通过对刺参进行低温骤降试验,利用SSH技术构建刺参低温骤降双向消减cDNA文库,共获得6 800个阳性克隆,从文库中随机挑取1 000个阳性克隆测序,共获得680条有效EST序列.利用Blastx软件将测序结果与GenBank数据库进行比对,结果显示:72个克隆与已知基因高度同源,其中有6个基因与应激和免疫反应相关,存在于正向文库的有4个,分别为铁蛋白、溶菌酶、类似紫海胆冷诱导β-RNA结合蛋白和huadl3021索转铁蛋白,存在于反向文库的有2个,分别为热休克同源蛋白70和热休克蛋白gp96;有3个基因与营养代谢和运输相关,且都存在于反向文库,分别为主要卵黄蛋白1、主要卵黄蛋白2和胰淀粉酶.研究表明,刺参低温骤降文库的成功构建对阐述其耐低温分子机制有非常重要的意义,为刺参育种和生物学研究提供了新的资料.
利用抑製性消減雜交(Suppression subtractive hybridization,SSH)技術,對刺參A0ostichopus japonicus耐低溫性狀相關的基因進行研究.通過對刺參進行低溫驟降試驗,利用SSH技術構建刺參低溫驟降雙嚮消減cDNA文庫,共穫得6 800箇暘性剋隆,從文庫中隨機挑取1 000箇暘性剋隆測序,共穫得680條有效EST序列.利用Blastx軟件將測序結果與GenBank數據庫進行比對,結果顯示:72箇剋隆與已知基因高度同源,其中有6箇基因與應激和免疫反應相關,存在于正嚮文庫的有4箇,分彆為鐵蛋白、溶菌酶、類似紫海膽冷誘導β-RNA結閤蛋白和huadl3021索轉鐵蛋白,存在于反嚮文庫的有2箇,分彆為熱休剋同源蛋白70和熱休剋蛋白gp96;有3箇基因與營養代謝和運輸相關,且都存在于反嚮文庫,分彆為主要卵黃蛋白1、主要卵黃蛋白2和胰澱粉酶.研究錶明,刺參低溫驟降文庫的成功構建對闡述其耐低溫分子機製有非常重要的意義,為刺參育種和生物學研究提供瞭新的資料.
이용억제성소감잡교(Suppression subtractive hybridization,SSH)기술,대자삼A0ostichopus japonicus내저온성상상관적기인진행연구.통과대자삼진행저온취강시험,이용SSH기술구건자삼저온취강쌍향소감cDNA문고,공획득6 800개양성극륭,종문고중수궤도취1 000개양성극륭측서,공획득680조유효EST서렬.이용Blastx연건장측서결과여GenBank수거고진행비대,결과현시:72개극륭여이지기인고도동원,기중유6개기인여응격화면역반응상관,존재우정향문고적유4개,분별위철단백、용균매、유사자해담랭유도β-RNA결합단백화huadl3021색전철단백,존재우반향문고적유2개,분별위열휴극동원단백70화열휴극단백gp96;유3개기인여영양대사화운수상관,차도존재우반향문고,분별위주요란황단백1、주요란황단백2화이정분매.연구표명,자삼저온취강문고적성공구건대천술기내저온분자궤제유비상중요적의의,위자삼육충화생물학연구제공료신적자료.